[发明专利]光诱导激活的Dre重组系统

说明书

本发明提供了一种光诱导激活的Dre重组系统。具体地，本发明提供了一种拆分式蛋白以及融合蛋白，本发明的光诱导激活的Dre重组系统具有更高的时空特异性，可应用于谱系示踪、细胞清除等多个领域，联合启动子的特异性，利用局部蓝光照射实现更为精确的基因操作。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体地涉及光诱导激活的Dre重组系统。

背景技术

Dre重组酶来源于D6噬菌体，和常用的Cre重组酶一样同属于酪氨酸重组酶家族。它可以特异性的识别一段长度为32bp的DNA序列(rox),使rox位点间的基因序列被删除或重组。

目前比较常用的可诱导重组酶系统是DreER，该系统是将雌激素受体的配体结合域与Dre重组酶融合表达，形成定位于胞浆的融合蛋白。当配体他莫昔芬出现后Dre重组酶从锚定蛋白上解离入核发挥重组功能。或者是使用RU486诱导的DrePBD系统，来时间特异性的调控重组酶的表达。但是这些方法都有一定的局限性，其一利用化学药物诱导可能会扰乱细胞内源信号通路，例如他莫昔芬可能和内源的雌激素受体结合，从而影响机体的正常功能。其二化学药物诱导需要时间较长，至少需要对动物进行为期一周的药物处理，而且容易被快速代谢从而抑制诱导效果。其三药物诱导的范围过大，借助特异性的启动子可以在一定程度上实现空间特异性，但对于全身分布缺乏组织特性的细胞群体无法实现精确操作。

因此，本领域迫切需要建立一个可以时空特异性调控Dre重组酶表达诱导系统。

发明内容

本发明的目的是建立一个可以时空特异性调控Dre重组酶表达诱导系统。

本发明的第一方面，提供了一种拆分式蛋白，所述蛋白包括Z1元件或Z2元件，其中Z1元件为Dre重组酶的N端片段；Z2元件为Dre重组酶的C端片段；

并且，当Z1为Dre_1-60片段时，Z2为Dre_61-343片段；

当Z1为Dre_1-65片段时，Z2为Dre_66-343片段；

当Z1为Dre_1-66片段时，Z2为Dre_67-343片段；

当Z1为Dre_1-67片段时，Z2为Dre_68-343片段；

当Z1为Dre_1-103片段时，Z2为Dre_104-343片段；

当Z1为Dre_1-104片段时，Z2为Dre_105-343片段；

当Z1为Dre_1-105片段时，Z2为Dre_106-343片段；

当Z1为Dre_1-107片段时，Z2为Dre_108-343片段；

当Z1为Dre_1-108片段时，Z2为Dre_109-343片段；

当Z1为Dre_1-109片段时，Z2为Dre_110-343片段；

当Z1为Dre_1-150片段时，Z2为Dre_151-343片段；

当Z1为Dre_1-151片段时，Z2为Dre_152-343片段；

当Z1为Dre_1-152片段时，Z2为Dre_153-343片段；