[发明专利]光诱导激活的Dre重组系统

权利要求书

1.一种融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白为第一融合蛋白和第二融合蛋白的组合；其中，所述第一融合蛋白的结构如式I或式I’所示：

Z1-L1-A1 (I)；

A1-L1-Z1 （I’）；

所述第二融合蛋白的结构如式II或式II’所示：

Z2-L2-A2 （II）；

A2-L2-Z2（II’）；

式中，

Z1为Dre重组酶的N端片段；

L1为任选的第一连接肽；

A1为光敏蛋白的第一元件；

Z2为Dre重组酶的C端片段；

A2为光敏蛋白的第二元件；

L2为任选的第二连接肽；

各“-”独立地为连接肽或肽键或非肽键；

所述Dre重组酶的N端片段为基于SEQ ID NO.:10的N端片段，所述Dre重组酶的C端片段为基于SEQ ID NO.:10的C端片段，并且所述Dre重组酶的N端片段为Dre_1-60片段，所述Dre重组酶的C端片段为Dre_61-342片段；或所述Dre重组酶的N端片段为Dre_1-150片段，所述Dre重组酶的C端片段为Dre_151-342片段；或所述Dre重组酶的N端片段为Dre_1-246片段，所述Dre重组酶的C端片段为Dre_247-342片段。

2.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白还含有核定位信号。

3.如权利要求2所述的融合蛋白，其特征在于，所述核定位信号选自下组：NLS^sv40、NLS^EGL-13、NLS^NLP、NLS^c-Myc、PY-NLSs、snRNPs、truncated NLS^sv40、NLS^TUS、或其组合。

4.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白具有SEQ ID NO.:11－12任一所示的氨基酸序列。

5.一种多核苷酸，其特征在于，所述的多核苷酸编码权利要求1所述的融合蛋白。

6.一种载体，其特征在于，所述的载体含有权利要求5所述的多核苷酸。

7.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有权利要求6所述的载体，或其基因组中整合有权利要求5所述的多核苷酸。

8.一种产生权利要求1所述的融合蛋白的方法，其特征在于，包括步骤：

在适合表达的条件下，培养权利要求7所述的宿主细胞，从而表达融合蛋白；和/或分离所述融合蛋白。

9.一种基因编辑试剂，其特征在于，包括权利要求1所述的融合蛋白。

10.一种试剂盒，其特征在于，包括权利要求9所述的基因编辑试剂。

11.一种权利要求1所述的融合蛋白的用途，其特征在于，用于制备试剂或试剂盒，所述试剂或试剂盒用于提高基因编辑效率。

12.一种进行基因编辑的方法，其特征在于，包括步骤：

(a) 提供第一融合蛋白和第二融合蛋白，其中所述第一融合蛋白和第二融合蛋白的结构如权利要求1中所示；

(b) 在光照下，将第一融合蛋白和第二融合蛋白形成复合物，从而在所述复合物存在下进行基因编辑。

13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述光照强度为0.1-20mw/cm²。

14.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述基因编辑在体外细胞中进行。