[发明专利]一种牙囊干细胞的鉴定方法、引物组及试剂盒有效
申请号: | 201910748269.0 | 申请日: | 2019-08-14 |
公开(公告)号: | CN110527716B | 公开(公告)日: | 2022-10-04 |
发明(设计)人: | 雷童;张晓霜;陈鹏;杜宏武 | 申请(专利权)人: | 康妍葆(北京)干细胞科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6876 | 分类号: | C12Q1/6876;C12Q1/6851;C12N15/11;G16B25/10;G16B45/00 |
代理公司: | 北京国林贸知识产权代理有限公司 11001 | 代理人: | 郑俊彦;许文娟 |
地址: | 102600 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 干细胞 鉴定 方法 引物 试剂盒 | ||
1.一种牙囊干细胞的鉴定方法,其特征在于,所述鉴定方法包括细胞总RNA的提取、反转录获取cDNA模板,再利用测定HEXB基因表达水平的特异性引物进行荧光定量PCR扩增,根据扩增结果进行统计学检验,用甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)作为参考基因组将Ct值标准化,并使用建立的基于效率的ΔΔCt方法将每个样品进行比较,为了评估表达强度,将归一化的Ct值(ΔCt)转换为归一化的表达值,根据下式:EN=2^(-ΔCt),计算2^(-ΔΔCt),作图分析,HEXB基因mRNA相对高表达的来源于牙囊组织的成纤维状细胞,即是牙囊干细胞;所述鉴定方法用于将SCAP和DFSC细胞进行区分,且待测样品为SCAP和DFSC细胞。
2.根据权利要求1所述的鉴定方法,其特征在于,所述HEXB特异性引物为以下任意一组:
上游引物 下游引物 序列表中SEQ ID No.1所示的上游引物 序列表中SEQ ID No.2所示的下游引物 序列表中SEQ ID No.3所示的上游引物 序列表中SEQ ID No.4所示的下游引物 序列表中SEQ ID No.5所示的上游引物 序列表中SEQ ID No.6所示的下游引物 序列表中SEQ ID No.7所示的上游引物 序列表中SEQ ID No.8所示的下游引物 序列表中SEQ ID No.9所示的上游引物 序列表中SEQ ID No.10所示的下游引物 序列表中SEQ ID No.11所示的上游引物 序列表中SEQ ID No.12所示的下游引物 序列表中SEQ ID No.13所示的上游引物 序列表中SEQ ID No.14所示的下游引物 序列表中SEQ ID No.15所示的上游引物 序列表中SEQ ID No.16所示的下游引物 序列表中SEQ ID No.17所示的上游引物 序列表中SEQ ID No.18所示的下游引物 序列表中SEQ ID No.19所示的上游引物 序列表中SEQ ID No.20所示的下游引物 序列表中SEQ ID No.21所示的上游引物 序列表中SEQ ID No.22所示的下游引物
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