[发明专利]荧光假单胞菌荧光定量PCR快速检测方法及试剂盒和应用

权利要求书

1.一种荧光假单胞菌荧光定量PCR快速检测方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：

(1)应用选择性增菌液中对待检样品进行增菌，并采用苯酚-氯仿-异戊醇法或煮沸法提取细菌基因组DNA；

(2)将步骤(1)获得的基因组DNA与引物和相应的探针混合，进行荧光定量PCR检测，其中所述引物和探针如下：

以荧光假单胞菌pf SBW25的gyrB基因为模板，使用软件primer express3.0设计特异性检测引物和探针，其中检测引物gyrB-F序列为5’TGCGGTCAACCAGGTGTTCC3’，gyrB-R序列为5’CGAGATAATCGCGGTCAGG3’，探针gyrB-taqmen序列为5’CATCCAGCGTGAAGACGGCATCG3’。

2.根据权利要求1所述的荧光假单胞菌荧光定量PCR快速检测方法，其特征在于：

所述待检样品为食品或者是食品的细菌平板培养物。

3.根据权利要求1或2所述的荧光假单胞菌荧光定量PCR快速检测方法，其特征在于：所述taqman探针的终浓度为500nmol/L。

4.权利要求1至3任一项方法在检测样品中荧光假单胞菌的应用。

5.一种荧光假单胞菌荧光定量PCR快速检测试剂盒，其特征在于：

所述试剂盒包括PCR反应液，所述PCR反应液包括检测引物和探针，其中检测引物gyrB-F序列为5’TGCGGTCAACCAGGTGTTCC3’，gyrB-R序列为5’CGAGATAATCGCGGTCAGG3’，探针gyrB-taqmen序列为5’CATCCAGCGTGAAGACGGCATCG3’。

6.权利要求5所述的荧光假单胞菌荧光定量PCR快速检测试剂盒在检测样品中荧光假单胞菌的应用。