[发明专利]一种人五聚素3磁微粒化学发光免疫定量检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种人五聚素3的化学发光免疫定量检测试剂盒，其特征在于：包括链霉亲和素包被的磁微粒悬浮液，碱性磷酸酶标记的人五聚素3抗体，生物素标记的人五聚素3抗体，人五聚素3校准品。

2.根据权利要求1所述一种检测心血管疾病用药基因的试剂盒，其特征在于：所述链霉亲和素包被的磁微粒悬浮液为表面包裹带有链霉亲和素的超顺磁性纳米材料，悬浮于磁微粒包被物缓冲液中，浓度为0.1mg/mL～1.0mg/mL；磁微粒包被物缓冲液为20mM～200mMTris(三羟甲基氨基甲烷)缓冲液，PH为6.5～8.0。

3.根据权利要求1所述一种检测心血管疾病用药基因的试剂盒，其特征在于：所述碱性磷酸酶标记的人五聚素3抗体为碱性磷酸酶和人五聚素3抗体的偶联物，其中人五聚素3抗体为小鼠单克隆抗体。稀释于酶标记物缓冲液中，稀释比例为1:400～1:2000；酶标记物缓冲液为20mM～200mM Tris缓冲液，PH为6.5～8.0。

4.根据权利要求1所述一种检测心血管疾病用药基因的试剂盒，其特征在于：所述生物素标记的人五聚素3抗体为生物素和人五聚素3抗体的偶联物，其中人五聚素3抗体为小鼠单克隆抗体。稀释于生物素标记物缓冲液中，稀释比例为1:200～1:1000；生物素标记物缓冲液为20mM～200mM Tris缓冲液，PH为6.5～8.0。

5.根据权利要求1所述一种检测心血管疾病用药基因的试剂盒，其特征在于：所述人五聚素3校准品为含20％胎牛血清的校准品缓冲液，将人五聚素3抗原稀释至工作浓度，分别为0，0.50，5.00，25.00，50.00，100.00ng/mL；校准品缓冲液为20mM～200mM Tris缓冲液，PH为6.5～8.0。

6.权利要求1～5任一项所述试剂盒用于检测人五聚素3的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)碱性磷酸酶标记的人五聚素3抗体的制备；

2)生物素标记的人五聚素3抗体的制备；

3)人五聚素3校准品的制备；

4)组装。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤1)中，所述碱性磷酸酶标记的人五聚素3抗体的制备方法为，将碱性磷酸酶加入碳酸钠缓冲液(pH8.0)中，加入人五聚素3抗体，37℃反应4小时后，用用ProteinG亲和柱(GE公司)纯化酶标抗体，得到人五聚素3抗体酶结合物。稀释于酶标记物缓冲液中，稀释比例为1:400～1:2000。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤2)中，所述生物素标记的人五聚素3抗体的制备方法为，将人五聚素3抗体(小鼠，单克隆)加入碳酸钠缓冲液(pH8.0)中，加入生物素衍生物，37℃反应4小时后，用ProteinG亲和柱(GE公司)纯化生物素标记抗体，得到人五聚素3抗体生物素结合物。稀释于生物素标记物缓冲液中，稀释比例为1:200～1:1000。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤3)中，所述人五聚素3校准品的制备方法为，用校准品缓冲液将人五聚素3抗原稀释至工作浓度，分别为0，0.50，5.00，25.00，50.00，100.00ng/mL。

10.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤4)中，所述组装步骤为，将上述试剂组分组装成盒，于2～8℃条件下保存。