[发明专利]一株淡紫拟青霉菌株及其应用和从中提取毒素的方法

说明书

本发明公开了一种对烟粉虱具有致病作用的淡紫拟青霉毒素(Purpureocillium lilacinum)菌株SCAUPL‑1，保藏于广东省微生物菌种保藏中心（GDMCC），保藏号为GDMCC NO:60732；本发明还提供一种有效的玫烟色棒束孢毒素提取的方法及其在烟粉虱的生物防治中的应用。

技术领域

本发明涉及微生物领域，具体涉及生物防治领域，尤其涉及一种淡紫拟青霉毒素提取及鉴定的方法。

背景技术

烟粉虱(Bemisia tabaci Gennadius)隶属半翅目(Hemiptera)，粉虱科(Aleyrodidae)，小粉虱属Bemisia，又名棉粉虱、一品红粉虱、甘薯粉虱等。烟粉虱为多食性害虫，生物型众多，寄主广泛，危害极大。烟粉虱可通过直接刺吸及其有效传播病毒而对作物造成损害(吴乾兴,刘勇,张友军,等.烟粉虱常用药剂抗性监测研究[J].植物保护,2018,2(1):119-120)。给许多国家的农业生产造成了巨大损失。烟粉虱所传播的病毒种类超过150种，其中由双生病毒引起的番茄黄化曲叶病是一种毁灭性病害，严重时可导致番茄100％损失，并已蔓延至其它作物。之前主要采用化学防治。

由于化学杀虫剂的滥用，烟粉虱已对多种杀虫剂产生了抗性。农药的滥用不仅会导致土壤酸化、影响土壤微生物、不利作物的生长，人的健康也会因食用农药残留作物而受到影响。有机磷农药是我国生产量最大、应用最多的农药，也是我国主要环境污染源之一，研究微生物来解决农药污染的问题是未来趋势。

虫生真菌的资源丰富，已经记载种类有800多种(杨运华,杜开书,石明旺.虫生真菌的生物防治研究进展[J].河南科技学院学报(自然科学版),2011,39(01):34-37)，主要分属于子囊菌及结合菌门，其中子囊菌类的球孢白僵菌(Beauveria bassiana)、绿僵菌(Metarhizium)等被开发成为重要的害虫生防制剂。病原真菌防治昆虫具有毒性低、无污染、可持续性强、有害生物不易产生抗性等优点，可有效避免化学农药带来的农药残留超标、害虫抗药性增加等一系列问题。杀虫真菌农药的研制可以使化学防治与生物防治充分协调的结合使用，使害虫防治工作更加合理、有效。我国自50年代后期开始研究用虫生真菌治虫，主要是应用球孢白僵菌防治大豆食心虫等害虫(万方浩,叶正楚,郭建英,等.我国生物防治研究的进展及展望[J].昆虫知识,2000,(02):65-74)。因此，开发研究高效、质量稳定的杀虫真菌农药已成为害虫防治的关键问题。

淡紫拟青霉菌(Purpureocillium lilacinum)，隶属丝孢纲(Hyphomycetes)、丝孢科(Hyphomycetales)、丛梗孢科(Monilaceae)、拟青霉属(Purpureocillium)。从建属以来，有近50多种淡紫拟青霉菌被报道，且多为虫生真菌(赵培静,任文彬,缪承杜,等.淡紫拟青霉研究进展与展望[J].安徽农业科学,2007,35(30):9672-9674)，淡紫拟青霉菌(Purpureocillium lilacinum)最早分离于秘鲁根结线虫卵囊(梁照文.淡紫拟青霉的发酵条件研究及其与线虫互作机理研究方法的初探[D].南京农业大学,2007)，分布于世界各地，且寄主广泛、培养简单，防治植物病原线虫效果显著，可侵染半翅目、鳞翅目害虫，在防治植物病原菌方面也有良好效果，还能产生类生长素促进植物生长，对难溶磷酸盐类农药有降解作用。随着传统化学农药的长期使用，害虫和病原菌的抗药性日益增强、农药残留、环境污染等问题亟待解决。使用以天然产物作为先导化合物来开发新型农药是未来的一种趋势，因此深入研究淡紫拟青霉菌及其代谢产物得到了国内外研究学者广泛关注。