[发明专利]一株淡紫拟青霉菌株及其应用和从中提取毒素的方法有效

专利信息
申请号: 201910747277.3 申请日: 2019-08-14
公开(公告)号: CN110628649B 公开(公告)日: 2022-02-11
发明(设计)人: 吴建辉;肖卡特·阿里;乐扬;杨波 申请(专利权)人: 华南农业大学
主分类号: C12N1/14 分类号: C12N1/14;C12P21/00;C07K14/37;A01N63/30;A01P7/04;C12R1/79
代理公司: 北京知本村知识产权代理事务所(普通合伙) 11039 代理人: 刘江良
地址: 510642 广*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 淡紫 青霉 菌株 及其 应用 从中 提取 毒素 方法
【权利要求书】:

1.一种对烟粉虱具有致病作用的淡紫拟青霉 (Purpureocillium lilacinum)菌株,其保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏号为GDMCC NO: 60732。

2.如权利要求1所述的菌株在防治烟粉虱中的应用。

3.如权利要求2所述的应用,其特征在于,将所述菌株培养后制成孢子液、含孢子的菌剂。

4.一种从如权利要求1所述的菌株中提取淡紫拟青霉毒素的方法,其包括如下步骤:

(1)在所述菌株的发酵液加0.8-1.2倍体积的有机溶剂乙酸乙酯;

(2)超声波震荡30-50min以打破细胞壁加速毒素萃取;

(3)震荡后放入0-6 ℃冰箱静置,用分液漏斗把萃取液进行分液,保留萃取后的有机相;

(4)将萃取后的有机相进行蒸发得到粗毒素。

5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,在第(1)步,第(3)步或/和第(4)步测定其蛋白浓度,监测毒素产生和提取效果。

6.如权利要求4所述的方法,其特征在于,在第(1)步中添加的有机溶剂乙酸乙酯的量为所述菌株的发酵液的同等体积。

7.如权利要求4所述的方法,其特征在于,其中淡紫拟青霉 (Purpureocillium lilacinum)菌株的发酵液按下述方法制备:

将所述菌株的孢子悬浮液,在恒温摇床内摇瓶发酵后对菌液行抽滤,得到菌丝和发酵液,对发酵液离心取上清备用。

8.如权利要求4所述的方法,其特征在于,第(3)步是放入4℃冰箱中静置,时长20-28h,期间每隔7-9 h搅拌一次。

9.如权利要求4所述的方法,其特征在于,第(4)步所述蒸发是旋转蒸发方式。

10.一种由如权利要求4至9任一项所述的方法获得的淡紫拟青霉毒素粗毒素在防治烟粉虱中的应用。

11.如权利要求10所述的应用,其特征在于,是将粗毒素液体喷施在作物上。

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