[发明专利]一种还原性蛋白多肽及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种还原性蛋白多肽及其制备方法和应用，所述还原性蛋白多肽为将鸡蛋清蛋白和/或金枪鱼肉蛋白和/或花生粕蛋白用半胱氨酸蛋白酶和/或ALcalase碱性蛋白酶和/或中性蛋白进行酶解制得，具有还原性。通过将所述还原性蛋白多肽与亚硒酸钠或硒酸钠作用，可制得具有生物功能的活性纳米硒，实现机体对活性纳米硒的双组分吸收、双功能作用等功效。本发明制备的纳米硒粒径较小，有利于机体对纳米硒的吸收和利用，还具有抗氧化活性，有望成为一种新型、安全高效、功能突出的硒补充剂，广泛应用于动物生产、饲料生产与应用或人类健康食品领域。

技术领域

本发明属于生物化工或生物制药领域，涉及一种还原性蛋白多肽，具体涉及一种还原性蛋白多肽的制备方法及其应用。

背景技术

硒是人和动物必需的微量元素之一。硒与机体的抗氧化能力、抗癌作用、抗病毒、免疫功能等有着重要关系。大量研究及临床试验表明，缺硒会使人体当中一些重要的器官发生功能障碍，从而导致多种疾病，如肿瘤、心血管疾病，以及克山病等。目前，补充硒元素主要是亚硒酸钠(Na₂SeO₃)或硒酸钠(Na₂SeO₄)等无机盐，机体对无机盐的吸收及残留毒性不易于控制，有引发硒中毒的风险。

相对于无机硒，纳米硒具有更安全更高效地吸收利用率。通过无机硒还原制备的单质硒往往易于聚集，形成灰色或黑色的不溶性聚集态单质硒，聚集态单质硒没有生物活性，也不利于细胞吸收利用。最新研究表明，使用蛋白质或壳聚糖等大分子作为单质硒的分散剂或包埋剂，可制备出纳米硒颗粒，并能够防止单质硒聚集，但形成的大分子纳米硒颗粒粒径相对比较大，不利于机体的吸收利用，营养及功能性都比较单一。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的是提供一种粒径小，易于吸收的多肽包覆的活性纳米硒新产品。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种还原性蛋白多肽，所述还原性蛋白多肽通过食源性蛋白原料进行酶解制得；所述食源性蛋白源为鸡蛋清蛋白、金枪鱼肉蛋白、花生粕蛋白中的至少一种；所述酶解用酶为半胱氨酸蛋白酶、ALcalase碱性蛋白酶、中性蛋白酶中的至少一种。

本发明首次发现，通过使用半胱氨酸蛋白酶和/或ALcalase碱性蛋白酶和/或中性蛋白酶对鸡蛋清蛋白和/或金枪鱼肉蛋白和/或花生粕蛋白酶解，可获得具有还原性的蛋白多肽。本发明使用的蛋白原料及蛋白酶不可替换，暂未发现其它蛋白原料或其他蛋白酶的使用可产生具有还原性的蛋白多肽。

作为本发明的一种实施方式，所述还原性蛋白多肽的制备方法包括以下步骤：

S1)材料预处理：取所述食源性蛋白原料，加入质量为食源性蛋白原料1～20倍的水，混匀。

S2)酶解：调节pH至4.5～9.5，加入质量为食源性蛋白原料0.1％～10.0％的所述蛋白酶，25～65℃酶解5～500min；

S3)离心：置于水浴中90℃灭活20min，待冷却后离心，取上清液，即得到所述还原性蛋白多肽。

优选地，S3)步骤中灭活条件为90℃水浴20min，离心条件为4000g，20min，20℃。

本发明的所述还原性蛋白多肽可用于制备活性纳米硒。

本发明所述的还原性蛋白多肽兼具还原作用和包裹作用，无需额外添加还原剂，可高效制备活性纳米硒。

作为本发明还原性蛋白多肽用于制备活性纳米硒的一种优选实施方式，所述还原性蛋白多肽制备活性纳米硒的方法，包括以下步骤：取浓度为1.0～500mg/mL的所述还原性蛋白多肽，与0.001～10M，pH为3.0～8.0的亚硒酸钠或硒酸钠混匀，4～100℃反应10分钟至10小时，即得到含有活性纳米硒的溶液。