[发明专利]一种减毒病毒载体系统及其在制备抗恶性肿瘤的药物中的应用及药物使用方法

说明书

本发明揭示一种减毒病毒载体系统及其在制备抗恶性肿瘤的药物中的应用及药物使用方法，该病毒为RNA病毒，其遗传物质在哺乳动物细胞中不具备整合能力，该病毒为弹状病毒科、水疱性口炎病毒属，病毒载体系统结构基因嵌合编码的分子至少包括一种特异性针对免疫检查点分子的抑制剂，该减毒病毒载体系统嵌合表达针对免疫检查点的单链抗体的新型重组表达载体系统，可特异性在肿瘤细胞中完成复制的同时表达外泌结合肿瘤细胞表面分子的特异性抗体，释放肿瘤抗原的同时激活免疫细胞抗肿瘤的特异性免疫应答，同时外泌的单链抗体打破肿瘤微环境的免疫抑制作用，促进CTL细胞对肿瘤细胞的清除，促进机体产生系统性的特异性抗肿瘤免疫记忆反应，控制肿瘤的复发。

技术领域

本发明涉及生物医药领域领域，尤其涉及一种减毒病毒载体系统及其在制备抗恶性肿瘤的药物中的应用及药物使用方法。

背景技术

过去十年里，癌症患者治疗方案的选择范围发生了巨大的变化。随着对肿瘤生长和发展相关驱动突变(driver mutation)的认识、加上这些特定突变靶向分子抑制剂研发工作的开展，一个新的肿瘤治疗领域即精准肿瘤学随之而生，肿瘤免疫治疗的理论基础是免疫系统具有识别肿瘤相关抗原、调控机体攻击肿瘤细胞(高度特异性的细胞溶解)的能力。这个生物过程十分复杂，目前仍处于大量的基础研究之中。

上世纪90年代，多个科研小组已经发现了肿瘤抗原(tumor antigens)，T淋巴细胞可以通过主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex，MHC)依赖性方式识别这些肿瘤抗原。在某些情况下，抗原通常指病毒蛋白、突变的自体抗原(其中一些是驱动致癌基因driver oncogenes)、去阻遏(derepressed)胚胎抗原、过表达的已分化或自体正常蛋白。肿瘤细胞以多种途径产生并释放抗原，例如细胞内激酶，肿瘤细胞原发性坏死，放疗、化疗或靶向治疗的机体反应。除了抗原外，在细胞应激、缺氧、营养物质枯竭和创伤的环境中，死亡的肿瘤细胞也可以释放多种免疫原性的分子，这些分子可以与细胞表面或细胞内受体(例如toll样受体)结合，从而触发先天免疫反应(innate immune responses)。此外，肿瘤微环境中的特异性抗原递呈细胞(antigen-presenting cells，例如树突细胞)可以吞噬死亡的肿瘤细胞和可溶性抗原。CD8+T细胞。为了达到更好的区分效果，T细胞激活还设置了二级信号识别系统，一种由共刺激分子(costimulatory molecule)介导的信号通路。一旦在共刺激分子存在的情况下被激活，T细胞可以循着局部趋化因子的浓度梯度迁移到肿瘤微环境中。T细胞到达肿瘤细胞附近后，T细胞受体可以通过I型MHC-多肽复合物识别肿瘤细胞表面的同源抗原。T细胞可以释放细胞毒性因子(例如granzyme B颗粒酶B和perforins穿孔素)，这些细胞毒性因子可以调控抗原-表达性肿瘤细胞的直接溶解，同时对毗邻的无抗原-表达性肿瘤细胞产生旁观者效应(bystander effect)。有些肿瘤的微环境中存在大量的激活型效应淋巴细胞(effector lymphocytes)，这些肿瘤一般有较好的预后，而且对免疫治疗有较好的治疗响应，尽管存在肿瘤-免疫循环，但是已经成形的肿瘤可能通过多种宿主、肿瘤和免疫机制逃脱宿主的免疫侦测(detection)和清除(eradication)。

此外，有研究报道肿瘤微环境会聚集大量的抑制性免疫细胞，例如调控性CD4+阳性T细胞、肿瘤相关巨噬细胞、髓样抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells)，这些免疫细胞可以抑制激活型效应T细胞的活性。肿瘤细胞以何种方式死亡可能决定了何种免疫反应会被激活。例如，肿瘤细胞凋亡(apoptosis)可能会诱发T细胞耐受(T-celltolerance)，而肿瘤细胞坏死(necrosis)或焦亡(pyroptosis)、程序性细胞死亡可能会诱发激活型肿瘤特异性T细胞反应