[发明专利]还原衍生化共振瑞利散射法测定亚硝酸盐的方法和应用

说明书

本发明涉及一种还原衍生化共振瑞利散射法测定亚硝酸盐的方法，属于理化检验研究领域。亚硝酸盐的共振瑞利散射信号很弱，本发明采用在酸性条件下使样品中的亚硝酸盐与碘离子发生氧化还原反应生成碘单质，碘单质进一步与过量碘离子结合生成碘三离子，阳离子染料与碘三离子结合，形成一种能使体系RRS信号明显增强的离子缔合物，产生新的特征RRS光谱。在选定的条件下，亚硝酸盐浓度在0.0015～1.5μg/mL范围内与471cm^‑1处的RRS值存在良好的线性关系，据此建立了一种间接对亚硝酸盐进行定量分析的RRS方法。本发明适用于食品、环境样品中亚硝酸盐的测定，具有操作简便、快速、灵敏高、选择性好等优点。

技术领域

本发明属于理化检验研究领域，涉及还原衍生化共振瑞利散射法测定亚硝酸盐的方法，适用于食品、环境等复杂样品中亚硝酸盐的测定。

背景技术

亚硝酸盐是化学性食物中毒的主要致病因子之一，亚硝酸盐摄入过多会使血液中正常的血红蛋白(Fe²⁺)氧化成高铁血红蛋白(Fe³⁺)，导致组织缺氧，出现紫绀、头晕、嗜睡等症状，还可能出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻等胃肠刺激症状。而且，亚硝酸盐容易进一步形成具有强致癌性的亚硝胺化合物。

虽然亚硝酸盐可作为防腐剂和发色剂用于腌腊肉制品、酱卤肉制品和熏、烧、烤肉、油炸肉类、西式火腿、肉灌肠、发酵肉类等食品中，但长期食用或过量食用危害极大，目前尚未有理想的替代物。

目前亚硝酸盐的测定方法主要有分光光度法、离子色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。离子色谱法为国标第一法，选择性好，灵敏度较高，但仪器设备成本高，检测耗时长。这些方法存在操作过程繁琐、耗时等缺点，因此，建立简单、快速的检测亚硝酸盐的方法具有重要的意义。

共振瑞利散射(Resonance Rayleigh scattering，RRS)法是基于生色团在生物大分子上的聚集作用和小分子之间疏水作用力、电荷转移作用以及静电引力形成的离子缔合物产生强烈的RRS光谱进行检测的，具有灵敏度高、操作简便、仪器价廉以及分析速度快等优点。目前尚未有关于RRS法测定样品中亚硝酸盐的方法报道，因此，以RRS技术为手段建立亚硝酸盐的检测方法具有一定的实际意义。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中的缺点和不足，提供一种新的亚硝酸盐的测定方法，即还原衍生化共振瑞利散射法测定亚硝酸盐的方法，本发明提供的亚硝酸盐的测定方法简便、快速、仪器设备价格便宜，同时具有灵敏度高、选择性好的特性。

本发明的原理：亚硝酸盐自身的RRS信号很弱，不能通过RRS法直接测定亚硝酸盐。在酸性条件下使样品中的亚硝酸盐与碘离子发生氧化还原反应生成碘单质，碘单质进一步与过量的碘离子生成碘三离子，碘三离子与阳离子染料结合生成离子缔合物，该离子缔合物的RRS信号明显增强并产生新的RRS光谱，通过测定该离子缔合物的RRS信号间接对亚硝酸盐进行定量分析，本发明的方法的原理如式Ⅰ、式Ⅱ所示。

2NO₂^-+3I^-+4H⁺＝I₃^-+2NO+2H₂O

式Ⅰ

为了实现上述发明目的，本发明采用以下还原衍生化共振瑞利散射法测定亚硝酸盐的方法，在酸性条件下使样品中的亚硝酸盐与碘离子发生氧化还原反应生成碘单质，碘单质与过量的碘离子结合生成碘三离子，以阳离子染料作为探针分子，阳离子染料可与碘三离子结合生成离子缔合物，通过测定离子缔合物的RRS光谱对亚硝酸盐进行定量分析。

本发明的技术方案为：

还原衍生化共振瑞利散射法测定亚硝酸盐的方法，包括以下步骤：