[发明专利]基于自组装铁蛋白纳米抗原颗粒、小反刍兽疫疫苗及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201910716829.4 | 申请日： | 2019-08-05 |
| 公开（公告）号： | CN112321718B | 公开（公告）日： | 2022-06-17 |
| 发明（设计）人： | 李轶女;张志芳;胡小元;易咏竹;刘兴健;杜梦潭;李丹 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院生物技术研究所 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;A61K39/155;A61K39/385;A61K47/52;A61K47/65;A61K47/69;A61K47/64;A61P31/14 |
| 代理公司： | 北京思元知识产权代理事务所(普通合伙) 11598 | 代理人： | 余光军;张瑞雪 |
| 地址： | 100081 北京市海淀区中关*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 组装 铁蛋白 纳米 抗原 颗粒 反刍 疫苗 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种融合蛋白的同感序列的突变体，所述融合蛋白的同感序列的氨基酸序列为SEQID NO.1所示，其特征在于，所述突变体的氨基酸序列为SEQ ID NO.4所示。
2.权利要求1所述融合蛋白的同感序列的突变体的单位点突变体，其特征在于，将SEQID NO.4所示的氨基酸序列按照I140H、V170S、V196Q、L223H、L276H或V323K中的任何一种氨基酸单位点突变方式获得的单位点突变体。
3.权利要求1所述融合蛋白的同感序列的突变体的多位点突变体，其特征在于，将SEQID NO.4所示的氨基酸序列按照I140H-L223H-V196Q或V170S-V196Q-L276H进行多位点突变方式获得的多位点突变体。
4.权利要求1所述的突变体，权利要求2所述的单位点突变体或权利要求3所述的多位点突变体在制备小反刍兽疫疫苗中的用途。
5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，包括：将权利要求1所述突变体的编码基因，权利要求2所述的单位点突变体的编码基因或权利要求3所述的多位点突变体的编码基因在大肠杆菌原核表达系统中进行表达，收集并纯化所表达的抗原；
或者，将权利要求1所述的突变体的编码基因，权利要求2所述的单位点突变体的编码基因或权利要求3所述的多位点突变体的编码基因在家蚕表达系统或AcMNPV-昆虫细胞真核表达系统中进行表达，收集并纯化所表达的抗原；
或者，将权利要求1所述的突变体的编码基因，权利要求2所述的单位点突变体的编码基因或权利要求3所述的多位点突变体的编码基因克隆到杆状病毒哺乳动物的表达载体中得到重组杆状病毒；将重组杆状病毒在脊椎动物体内组织进行基因呈递产生抗原。
6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，将权利要求1所述的突变体的编码基因，权利要求2所述的单位点突变体的编码基因或权利要求3所述的多位点突变体的编码基因克隆到杆状病毒转移载体中构建得到重组转移载体；将重组转移载体与杆状病毒DNA共转染昆虫细胞，获得重组杆状病毒；将重组杆状病毒感染昆虫宿主或细胞，培养被感染的昆虫细胞或昆虫宿主表达相应的抗原，纯化，即得。
7.一种小反刍兽疫疫苗，其特征在于，包含有效量的权利要求1所述的突变体，权利要求2所述的单位点突变体或权利要求3所述的多位点突变体和药学上可接受的佐剂或载体。
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