[发明专利]降血糖功效的植物乳杆菌及其筛选方法和应用药剂及食品

说明书

本发明提供一种植物乳杆菌，该植物乳杆菌的保藏编号为CCTCC M 2019591，拉丁文名称为Lactobacillus plantarum CT152；提供一种具有降血糖功能的药剂，该药剂采用上述的植物乳杆菌。并提供一种植物乳杆菌的筛选方法，包括如下步骤：S1：进行益生指标测定；S2：进行抗氧化能力测定；S3：进行乳酸菌的抗糖尿病特性的检测；S4：进行体内实验的验证。本发明系统地建立起降糖乳酸菌的体外高效筛选方法，通过PCA和AHP结合的方式筛选得到一株有较好降糖效果的发明菌株CCTCC M 2019591，并得到了体内实验的效果验证。

技术领域

本发明具体涉及一种降血糖功效的植物乳杆菌及其筛选方法和应用药剂。

背景技术

国际糖尿病联盟公布了第八版的全球糖尿病地图。结果显示，全球糖尿病成人患者(20-79岁)从2000年的1.51亿，到2017年已达到4.25亿，增加近2 倍。预计到2045年，糖尿病患者可能达到6.29亿。而中国的糖尿病患者位居世界第一，糖尿病被公认为世界第三大致死性疾病，其发病率呈逐年增加趋势，且Ⅱ型糖尿病患者的比例高达90％以上。目前主要通过药物降低血糖来达到治疗Ⅱ型糖尿病的目的。针对糖尿病的降糖药物通常会引起一系列的不良反应，如腹泻、耐药性和继发性失效等问题。近年来由于乳酸菌的天然性和安全性，逐渐成为糖尿病防治的研究热点。

乳酸菌(Lactic acid bacteria,LAB)指发酵糖类，主要产物为乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌的总称。近几年研究发现，乳酸菌作为定居肠道中的有益菌群具有多种生理功能；维持肠道微生态平衡，影响血糖代谢等等。目前针对降糖乳酸菌的全面系统的体外筛选方法仍未建立，体内的动物实验筛选受时间、价格方面的因素受到了一定的限制，因此亟待对于目前的体外降糖乳酸菌的筛选方法进行评估和整合，建立一套全面地、系统地降糖乳酸菌的筛选方法，为乳酸菌降糖的机制研究提供一定的技术和方法支撑。之前陈佩等研究者运用主成分分析法从体外筛选得到2株降糖乳酸菌，并且在体内进行了验证其降糖效果，但是其筛选指标不够全面，如并未对乳酸菌的安全性进行评估。本发明根据前期研究者的体外功能菌的筛选指标进行整合和补充，运用主成分分析法(PCA)和层次分析法(AHP)相结合，建立高效降糖乳酸菌的筛选方法，并且在体内得到了证实，这为乳酸菌降糖的机制研究提供一定的技术和方法支撑。

发明内容

本发明解决的技术问题之一是体外降糖乳酸菌的筛选方法的建立；本发明要解决的技术问题之二是提供应用上述筛选方法得到的一株经过体内验证得降糖菌株Lactobacillus plantarum CT152，它在体外模拟的胃肠液和胆盐环境下具有较高的存活率；且具有一定的抗氧化和抗糖尿病的特性；本发明要解决的技术问题之二是提供一种应用到该降糖菌株Lactobacillus plantarum CT152的降血糖药剂。

为达到上述要求，本发明采取的技术方案是：提供一种植物乳杆菌，该植物乳杆菌的保藏编号为CCTCC NO: M 2019591，拉丁文名称为Lactobacillus plantarum CT152，保藏地为中国典型培养物保藏中心，保藏地地址为湖北省武汉市武昌区八一路229号武汉大学校内，保藏日期为2019年7月30日；提供一种具有降血糖功能的药剂，采用上述的植物乳杆菌；提供一种植物乳杆菌的筛选方法，包括如下步骤：

S1：进行益生指标测定，包括模拟的胃肠液中的存活率测定、胆盐耐受力测定、对Caco-2细胞的粘附能力测定及抗生素耐药性检测；

S2：进行抗氧化能力测定，包括乳酸菌清除DPPH能力的测定、乳酸菌清除羟自由基能力测定、乳酸菌抗脂质过氧化能力测定、乳酸菌的还原能力测定及乳酸菌的GSH-Px和T-SOD的酶活测定；

S3：进行乳酸菌的抗糖尿病特性的检测，包括大鼠肠道α-glucosidase活力抑制率的测定和乳酸菌干预高糖刺激胰岛细胞分泌胰岛素实验；以及

S4：进行体内实验的验证，包括2型糖尿病模型大鼠的构建及进行灌胃治疗。