[发明专利]一种机械化学辅助提取木芙蓉花活性组分的方法

说明书

本发明提供一种机械化学辅助提取木芙蓉花活性组分的方法，该方法包括如下步骤：木芙蓉花用行星式球磨机进行磨粉，将原料与球磨助剂混合球磨；加入水充分混合搅拌均匀，经过蛋白酶酶解得到木芙蓉多糖粗提物；将配制Sevage试剂与木芙蓉多糖粗提物混合振摇，所得提取液旋蒸除去溶剂中的醇，加水定容，通过大孔树脂分离，再通过DEAE‑52离子色谱及SephasexG‑100凝胶色谱进行纯化分离，得到木芙蓉花多糖。

技术领域

本发明涉及木芙蓉花多糖制备领域，特别涉及一种机械化学辅助提取木芙蓉花活性组分的提取制备方法。

背景技术

木芙蓉(Hibiscus mutabilis L.)为锦葵科木槿属植物，其味微辛，性平，归肺、肝经，具清热解毒、消肿排脓与凉血止血之功效。木芙蓉的花、叶、根两者或三者并用有增强疗效的作用。木芙蓉的化学成分主要包括黄酮、多糖、有机酸、挥发性成分，以及豆甾、蒽醌、香豆素、三萜和木质素。机械化学辅助提取技术是将机械力和化学反应相结合后应用到天然药物活性成分提取的一门新技术，机械化学辅助提取技术是将机械力和化学反应相结合后应用到天然药物活性成分提取的一门新技术，机械化学辅助提取在异秦皮啶、硫酸软骨素、芦丁、黄酮等的提取中都得到了广泛的应用。罐内的球体由于其惯性作用对位于光滑的碾磨罐内额壁上的样品进行带有高能量的撞击，并以此粉碎样品。碾磨罐的转动加上碾磨球的运动对样品产生了高强度的混合作用。通过使用多个小球甚至可以进一步的提高混合的效果。球与球之间的摩擦撞击作用可以有效导致细胞的破碎。

发明内容

本发明公开了一种机械化学辅助提取木芙蓉花多糖成分制备方法。采用本工艺将机械化学用于辅助木芙蓉花有效组分提取，大大缩短了生产步骤；并且显著性提高产品提取率，工艺简单、操作方便、易于实现工业化生产。

本发明采用的技术方案是：

一种机械化学辅助提取木芙蓉花活性组分的方法，该方法包括如下步骤：木芙蓉花用行星式球磨机进行磨粉，将原料与球磨助剂混合球磨；加入水充分混合搅拌均匀，经过蛋白酶酶解得到木芙蓉多糖粗提物；所述的蛋白酶为纤维素酶/木瓜蛋白酶、纤维素酶/果胶酶、木瓜蛋白酶/果胶酶、纤维素酶/木瓜蛋白酶/果胶酶等复合酶体系，优选为纤维素酶/木瓜蛋白酶、纤维素酶/果胶酶等复合酶体系；

将配制Sevage试剂与木芙蓉多糖粗提物混合振摇，所得提取液旋蒸除去溶剂中的醇，加水定容，通过大孔树脂分离，再通过DEAE-52离子色谱及SephasexG-100凝胶色谱进行纯化分离，得到木芙蓉花多糖；

所述的大孔树脂为ADS-17、XAD16、XAD 4、XAD1600N、HP 21、SP207、SP700ADS-7、HP2MGL中的一种或两种以上的混合。

在本发明一些实施例中，所述的助磨剂为NaOH、Na₂CO₃、NaCl或NaHCO₃；优选为NaOH。

在本发明一些实施例中，所述的球磨提取的转速为100-500rpm，优选为300-400rpm。

在本发明一些实施例中，所述的球磨时间为10-60min，优选为30-40min。

在本发明一些实施例中，所述的木芙蓉花用量与助磨剂用量的比例为20:1-1:1，优选为10:1-4:1。

在本发明一些实施例中，所述的料液比(g/mL)为1:5-1:50，优选为1:20-1:40。

在本发明一些实施例中，所述的酶解温度为20-50℃，优选为30-40℃；所述的酶解时间为10-60min，优选为20-40min。

在本发明一些实施例中，所述的上样量为5-60BV，优选为10-40BV。

在本发明一些实施例中，所述的大孔树脂为XAD 4、XAD 1600N、ADS-7、HP2MGL一种或两种以上的混合。