[发明专利]一种机械化学辅助提取木芙蓉花活性组分的方法有效
申请号: | 201910702985.5 | 申请日: | 2019-07-31 |
公开(公告)号: | CN110615854B | 公开(公告)日: | 2021-12-07 |
发明(设计)人: | 王平;陈卓逸 | 申请(专利权)人: | 湖州耕香生物科技有限公司;浙江工业大学 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00 |
代理公司: | 杭州丰禾专利事务所有限公司 33214 | 代理人: | 王静 |
地址: | 313200 浙江省湖州市德清县阜*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 机械 化学 辅助 提取 木芙蓉 活性 组分 方法 | ||
1.一种机械化学辅助提取木芙蓉花活性组分的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:木芙蓉花用行星式球磨机进行磨粉,将原料与球磨助剂混合球磨;以料液比1:5-1:50g/mL加入水充分混合搅拌均匀,经过蛋白酶酶解得到木芙蓉多糖粗提物;所述的蛋白酶选自纤维素酶/木瓜蛋白酶、纤维素酶/果胶酶其中一种;将配制Sevage试剂与木芙蓉多糖粗提物混合振摇,所得提取液旋蒸除去溶剂中的醇,加水定容,通过大孔树脂分离,再通过DEAE-52离子色谱及SephasexG-100凝胶色谱进行纯化分离,得到木芙蓉花多糖;
所述的大孔树脂为ADS-17、XAD16、XAD4、XAD1600N、HP21、SP207、SP700ADS-7、HP2MGL中的一种或两种以上的混合;
所述的球磨助剂为NaOH、Na2CO3、NaCl或NaHCO3;且所述的木芙蓉花用量与助磨剂用量的比例为20:1-1:1。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的助磨剂为NaOH。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的球磨的转速为100-500rpm。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的球磨时间为10-60min。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的木芙蓉花用量与助磨剂用量的比例为10:1-4:1。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的料液比1:20-1:40。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的酶解温度为20-50℃;所述的酶解时间为10-60min。
8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的大孔树脂为XAD 4、XAD 1600N、ADS-7、HP2MGL一种或两种以上的混合。
9.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法按照如下步骤进行:将木芙蓉花用行星式球磨机进行磨粉,将原料与适量球磨助剂NaOH混合,加入水充分混合搅拌均匀,采用纤维素酶/木瓜蛋白酶或纤维素酶/果胶酶或木瓜蛋白酶/果胶酶或纤维素酶/木瓜蛋白酶/果胶酶复合酶体系在30-40℃下进行酶解20-40min,得到木芙蓉多糖粗提物;
配制Sevage试剂(氯仿:正丁醇体积=1:4(V/V)),将Sevage试剂与木芙蓉多糖粗提物(V/V=1:3)混合振摇,振摇20min,静置15min直至完全分层,离心倾倒除去蛋白层,反复重复5次直至溶液完全澄清;所得提取液旋蒸除去溶剂中的醇,加水定容至一定体积,加入适当上样量的木芙蓉粗提物,大孔树脂分离,再通过DEAE-52离子色谱及SephasexG-100凝胶色谱进行纯化分离,得到木芙蓉花多糖,所述的大孔树脂为XAD 4、XAD 1600N、ADS-7、HP2MGL中的一种或多种的混合。
10.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述的球磨时间为30-40min。
11.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述的酶解温度为30-40℃,所述的酶解时间为20-40min。
12.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述的球磨的转速为300-400rpm。
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