[发明专利]一种用于选择性检测人血清白蛋白的自组装纳米荧光探针的应用

权利要求书

1.酰肼希夫碱形成的自组装纳米荧光探针，其特征在于，具有如下所示结构式：

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2.权利要求1所述的酰肼希夫碱形成的自组装纳米荧光探针在制备HSA定性和定量检测试剂中的应用。

3.权利要求2所述的酰肼希夫碱形成的自组装纳米荧光探针在制备HSA定性和定量检测试剂中的应用，其合成方法按如下反应制备：

（1）将吡嗪-2-羧酸充分溶解于无水甲醇中，然后加入适量浓硫酸加热回流4-6 h，待反应结束冷却后，用饱和NaHCO₃调节pH值至中性，用二氯甲烷萃取并保留二氯甲烷层，旋蒸除去溶剂后得油状物吡嗪-2-羧酸甲酯；将其用无水甲醇溶解后，逐滴加入水合肼，加热回流20-22 h后，冷却至室温，旋蒸除去甲醇得红色固体产物吡嗪-2-酰肼；其中吡嗪-2-羧酸甲酯与水合肼投料物质的量之比为1:1.5-5；

（2）将4-（二乙胺基）水杨醛溶解于无水乙醇中，依次加入丙二酸二乙酯和哌啶，加热回流18-20 h，冷却后旋蒸除去反应溶剂，再加入浓盐酸和冰醋酸加热回流18-22 h后,转移至冰水中用NaOH调节pH至5，过滤水洗干燥后得灰色固体7-二乙氨基香豆素；将POCl₃缓慢加入到DMF中，在20-50℃以及氩气保护下搅拌30 min形成红色透明溶液，将上述灰色固体溶于DMF并加入到该红色溶液中，在60-70℃下搅拌16-20 h后,转移到冰水中用NaOH调节pH为5-5.5，过滤后得黄色固体产物7-二乙氨基香豆素醛；其中4-（二乙胺基）水杨醛、丙二酸二乙酯和哌啶投料的物质的量之比为1:1.5:1-2；

（3）将（1）和（2）所得终产物溶解于无水甲醇中,加热回流5-8 h至反应完全，待反应液冷却至室温，过滤，用无水甲醇洗涤固体，真空干燥，即得到该酰肼希夫碱荧光探针分子；其中吡嗪-2-酰肼和7-二乙氨基香豆素醛的投料物质的量比为1:1。

4.权利要求3所述的酰肼希夫碱形成的自组装纳米荧光探针，其特征在于，化合物在PBS缓冲液中形成自组装纳米荧光探针；PBS缓冲液的pH = 7-8；所述化合物的结构为

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5.权利要求4所述的酰肼希夫碱形成的自组装纳米荧光探针，其特征在于，将HSA加入到权利要求4所述的PBS缓冲液中形成自组装纳米荧光探针，在365 nm 紫外灯下，溶液由无色变为绿色，可实现对HSA的快速检测。

6.权利要求5所述的酰肼希夫碱形成的自组装纳米荧光探针，其特征在于，在450 nm激发光下，本身几乎没有荧光信号，与HSA作用后，在512 nm处产生很强的绿色荧光信号，且对HSA的定量检测浓度范围为0-5μm，检测限为8.76 nM。

7.权利要求5所述的酰肼希夫碱形成的自组装纳米荧光探针在制备用于检测活细胞和尿液样品中HSA 试剂方面的应用。