[发明专利]一种索玛鲁肽的纯化方法有效
| 申请号： | 201910685603.2 | 申请日： | 2019-07-27 |
| 公开（公告）号： | CN112279907B | 公开（公告）日： | 2023-10-03 |
| 发明（设计）人： | 姚林;蔡志伟;李新宇;张利香;邱心敏 | 申请（专利权）人： | 深圳市健元医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/605 | 分类号： | C07K14/605;C07K1/20 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 518118 广东省深圳市坪山区坑梓街道金*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 索玛鲁肽 纯化 方法 | ||
1.一种索玛鲁肽的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：将索玛鲁肽粗品溶于稀氨水中，得到索玛鲁肽粗品溶液，水浴后过滤，收集滤液；
步骤2：取所述滤液，以反相硅胶填料为固定相，以氨水调节pH至7～9的盐溶液为流动相A，乙腈为流动相B，梯度洗脱，收集馏分，旋蒸去除部分溶剂，得到索玛鲁肽一次纯化溶液；
步骤3：取索玛鲁肽一次纯化溶液，以反相硅胶填料为固定相，以磷酸调节pH至2～3的盐溶液为流动相A，乙腈和异丙醇的混合溶液为流动相B，梯度洗脱，收集馏分，旋蒸去除部分溶剂，得到索玛鲁肽二次纯化溶液；
步骤4：取索玛鲁肽二次纯化溶液，以反相硅胶填料为固定相，以碳酸氢铵的水溶液为流动相A，乙腈为流动相B，梯度洗脱，收集馏分，旋蒸、冻干，得到索玛鲁肽的无盐精肽。
2.根据权利要求1所述的一种索玛鲁肽的纯化方法，其特征在于：所述反相硅胶填料为八烷基键合硅胶填料。
3.根据权利要求1所述的一种索玛鲁肽的纯化方法，其特征在于：所述步骤2、3中的旋蒸参数为：25～35℃，真空度≤30mba。
4.根据权利要求1所述的一种索玛鲁肽的纯化方法，其特征在于：所述步骤4中的旋蒸参数为：25～35℃，真空度≤20mba。
5.根据权利要求1所述的一种索玛鲁肽的纯化方法，其特征在于：所述步骤1中的稀氨水浓度为1％～5％，磷酸调节pH至7.5～9。
6.根据权利要求5所述的一种索玛鲁肽的纯化方法，其特征在于：所述步骤1中的稀氨水浓度为2％，磷酸调节pH至8.0～8.5。
7.根据权利要求1所述的一种索玛鲁肽的纯化方法，其特征在于：所述步骤1中的水浴条件为：温度为：45～50℃，时间为1～2h。
8.根据权利要求1所述的一种索玛鲁肽的纯化方法，其特征在于：所述步骤2中的盐溶液pH为8.5。
9.根据权利要求1所述的一种索玛鲁肽的纯化方法，其特征在于：所述步骤2中的盐溶液为20～100mM/L的铵盐溶液。
10.根据权利要求9所述的一种索玛鲁肽的纯化方法，其特征在于：所述步骤2中的盐溶液为50mM/L的氯化铵溶液。
11.根据权利要求1所述的一种索玛鲁肽的纯化方法，其特征在于：所述步骤2中的梯度为：0～5min：B％为10％～26％；5～120min：B％为26％～46％。
12.根据权利要求1所述的一种索玛鲁肽的纯化方法，其特征在于：所述步骤3中的盐溶液pH为2.6。
13.根据权利要求1所述的一种索玛鲁肽的纯化方法，其特征在于：所述步骤3中的盐溶液为20～100mM/L的磷酸盐溶液。
14.根据权利要求13所述的一种索玛鲁肽的纯化方法，其特征在于：所述步骤3中的盐溶液为50mM/L的磷酸二氢钾溶液。
15.根据权利要求1所述的一种索玛鲁肽的纯化方法，其特征在于：所述步骤3中的流动相B为乙腈：异丙醇＝7:3～9:1。
16.根据权利要求1所述的一种索玛鲁肽的纯化方法，其特征在于：所述步骤3中的流动相B为乙腈：异丙醇＝7:3。
17.根据权利要求1所述的一种索玛鲁肽的纯化方法，其特征在于：所述步骤3中的梯度为：0～5min：B％为10％～45％；5～120min：B％为45％～70％。
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