[发明专利]一种快速测定食用油中苯并(α)芘的胶体金免疫层析法

说明书

本发明公开了一种快速测定食用油中苯并(α)芘的胶体金免疫层析法，通过加入固体吸附剂N‑丙基乙二胺、十八烷基硅烷键合硅胶和大孔强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂对样品进行除脂，后采用胶体金免疫层析法进行检测。本发明敏感度更好、特异性更强，不用使用放射性同位素，应用范围广，检出限可达5μg/kg，灵敏度达到99％，特异性达到95％，相对准确度达到97％，固体吸附剂除脂率达到98％；减少有机试剂的使用，绿色环保，缩短前处理时间，操作简便，降低了检测成本。

技术领域

本发明属于食品检测领域，特别涉及一种快速测定食用油中苯并(α)芘的胶体金免疫层析法。

背景技术

苯并(α)芘又称3，4-苯并(α)芘，属于多环芳烃类化合物，是一种高活性的间接致癌物。苯并(α)芘虽不会使人急性中毒，但具有强致癌性和致畸性的特性，是世界三大强致癌物之一。苯并(α)芘可以引发肺癌、胃癌、膀胱癌及消化道癌等多种癌症，它能通过母体胎盘影响子代，从而引起胚胎畸形从而使幼仔免疫力下降甚至死亡。之前发生的“金浩”茶油的正是因为苯并(α)芘的超标，从而再次敲响了食用油安全的警钟。

苯并(α)芘分子式为C₂₀H₁₂，分子量为252.32，其化学性质稳定，在烹调过程中又不易被破坏。苯并(α)芘是因为油料在晒干、烟熏、炒制的过程中产生，当人们使用溶剂浸出法制油时，所用溶剂中含有多环芳烃；油受热温度过高和时间较长时可生成苯并(α)芘。

现阶段，世界各国对食用油中苯并(α)芘的限量规定不尽相同。欧盟规定食用油中苯并(α)芘的限量为2μg/kg，国际食品法典委员会(CΑC)规定食用油脂中苯并(α)芘的限量为5μg/kg，而我国动植物油脂中苯并(α)芘的限量为10μg/kg，本发明的方法检出限能够满足我国国家限量要求。

目前，针对苯并(α)芘的检测方法主要有液相色谱法、气相色谱质谱法、薄层色谱法、荧光分光光度法等。薄层色谱法和荧光分光光度法由于灵敏度较低，抗干扰能力差，已经少用于检测。比较常用的是气相色谱-质谱法和高效液相色谱法。高效液相色谱法检测具有灵敏度高，选择性强，具有较好的抗干扰能力等优点，但存在样品检测周期长、操作复杂、设备昂贵、检测成本高等缺点。气相色谱-质谱法灵敏度高，分辨率高，但是易受基质干扰，因此对样品的净化程度要求较高，前处理比较复杂。

植物油中苯并(α)芘亲油性好，稳定性差，容易吸附，且样品基体成分复杂，存在多种潜在干扰物质，如大量甘油三酯和脂肪物质，这些特点都影响着苯并(α)芘的直接测定。国标法(GB 5009.27-2016)和现有技术中大多运用中性氧化铝固相萃取柱、硅胶固相萃取柱和分子印迹柱进行净化。固相萃取柱存在容量有限，试剂耗费量大、耗时长等问题；分子印迹柱价格昂贵、检测成本高。针对现今存在的问题，本发明致力于研究一种快速检测食用油中苯并(α)芘的方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种测定食用油中苯并(α)芘的快速检测方法。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种食用油中苯并(α)芘的检测方法，包括以下步骤：

1)将正己烷、DMSO加到待测样品中并混匀，离心后取下层石油醚；

2)将氢氧化钠和下层石油醚涡旋振荡，离心，吸取上层石油醚后加到含有N-丙基乙二胺、十八烷基硅烷键合硅胶以及大孔强碱性苯乙烯系的阴离子交换树脂中，离心，取上层石油醚；

3)吹干上层石油醚，加入DMSO复溶得待测液；

4)在反应杯中加入PBST和待测液，抽吸至混合均匀，室温反应；

5)试剂条的样品垫完全插入到反应杯，7～10min后取出试纸条，弃去试纸条的样品垫，观察质控线与检测线并进行结果判定。判定方法如下：