[发明专利]一种快速测定食用油中苯并(α)芘的胶体金免疫层析法

权利要求书

1.一种食用油中苯并(α)芘的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将正己烷、DMSO加到待测样品中并混匀，离心后弃去上层正己烷；

2)加入氢氧化钠、石油醚涡旋振荡，离心，吸取上层石油醚后加到含有N-丙基乙二胺、十八烷基硅烷键合硅胶以及大孔强碱性苯乙烯系的阴离子交换树脂中，离心，取上层石油醚；

3)取上层石油醚吹干，加入DMSO复溶得待测液；

4)在微孔中加入PBST和待测液，抽吸至混合均匀，室温反应；

5)试剂条的样品垫完全插入到微孔，7～10min后取出试纸条，弃去试纸条的样品垫进行结果判定；

判定方法如下：

阴性：检测线显色比质控线深或一样深，或检测线和质控线深浅比值大于等于1时，

则待测样品中无苯并(α)芘或苯并(α)芘浓度低于检测限；

阳性：检测线显色明显比质控线浅，或检测线和质控线深浅比值小于1时，则表示待测样品中有苯并(α)芘存在；

无效：质控线不出现颜色。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤1)正己烷、DMSO和待测样品的体积比为1:1:1。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤2)氢氧化钠溶液与石油醚体积比为2:3。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤2)涡旋振荡30～50s，4000～5000r/min离心30～40s。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤2)N-丙基乙二胺、十八烷基硅烷键合硅胶和大孔强碱性苯乙烯系阴离子的质量比为400:600:50。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤3)取全部石油醚层于氮吹管，50℃氮吹或空气吹5min，吹干后加入DMSO复溶得待测液。

7.一种食用油中苯并(α)芘的胶体金免疫检测装置由底板、吸水纸、质控线、硝酸纤维素膜、检测线、样品垫和反应杯依次首尾搭接；所述硝酸纤维素膜黏贴在底板中部，硝酸纤维素膜两端分别粘贴叠压有样品垫和吸水纸，酸纤维素膜靠近样品垫一端设有检测线，远离样品垫一端设有质控线，所述检测线上包被有苯并(α)芘抗原，所述质控线上包被有二抗，所述二抗为兔抗鼠IgG。

8.权利要求7食用油中苯并(α)芘的胶体金免疫检测装置的制备方法，包括以下步骤：

1)胶体金的制备：利用柠檬酸钠还原氯金酸的方法制备得胶体金溶液；

2)反应杯制备：在步骤1)制得的胶体金溶液中加入PBST缓冲溶液和苯并(α)芘单克隆抗体，混匀后，静置，然后加入牛血清白蛋白溶液，封闭，离心，复溶后得胶体金标记苯并(α)芘单克隆抗体，将其分装至反应杯里，冻干保存备用；

3)检测线和质控线的制备：将能与苯并(α)芘抗体结合的苯并(α)芘包被抗原，在硝酸纤维膜上进行线状点样制得；将能与苯并(α)芘抗体结合的二抗，在硝酸纤维膜上线状点样制得；

4)沿同一方向依次将样品垫、硝酸纤维膜、吸水纸搭接粘连；所述硝酸纤维膜上的检测限靠近样品垫一端，质控线靠近吸水纸一端。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，步骤2)所述静置2～3小时。

10.权利要求7所述的苯并(α)芘的胶体金免疫检测装置在检测食用油中苯并(α)芘的应用。