[发明专利]SVA、FMDV、SVDV和VSV的一步法多重实时荧光定量PCR检测引物和探针

权利要求书

1.用于对SVA、FMDV、SVDV和VSV进行多重实时荧光定量PCR检测的引物和Taqman探针，其特征在于：

用于检测SVA的上游引物(SVA1-F)和下游引物(SVA1-R)，所述上游引物(SVA1-F)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：5所示，下游引物(SVA1-R)的核苷酸序列如序列表中SEQID NO：6所示；

用于对SVA进行实时荧光定量PCR检测的TaqMan探针(SVA1-P)，所述TaqMan探针(SVA1-P)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：7所示；

用于检测FMDV的上游引物(FMDV1-F)和下游引物(FMDV1-R)，所述上游引物(FMDV1-F)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：8所示，下游引物(FMDV1-R)的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：9所示；

用于对FMDV进行实时荧光定量PCR检测的TaqMan探针(FMDV1-P)，所述TaqMan探针(FMDV1-P)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：10所示；

用于检测SVDV的上游引物(SVDV1-F)和下游引物(SVDV1-R)，所述上游引物(SVDV1-F)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：11所示，下游引物(SVDV1-R)的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：12所示；

用于对SVDV进行实时荧光定量PCR检测的TaqMan探针(SVDV1-P)，所述TaqMan探针(SVDV1-P)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：13所示；

用于检测VSV的上游引物(VSV1-F)和下游引物(VSV1-R)，所述上游引物(VSV1-F)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：14所示，下游引物(VSV1-R)的核苷酸序列如序列表中SEQID NO：15所示；

用于对VSV进行实时荧光定量PCR检测的TaqMan探针(VSV1-P)，所述TaqMan探针(VSV1-P)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：16所示；

所述探针为经过荧光标记的，其5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团；且对四种病毒检测探针所标记的荧光报告基团不相同。

2.根据权利要求1所述的引物和TaqMan探针，其特征在于：

所述用于对塞内卡病毒进行实时荧光定量PCR检测的TaqMan探针(SVA1-P)的5’端报告荧光基团为FAM，3’端荧光淬灭基团为TAMRA；

用于对口蹄疫病毒进行实时荧光定量PCR检测的TaqMan探针(FMDV1-P)的5’端报告荧光基团为ROX，3’端荧光淬灭基团为BHQ2；

用于对猪水疱病病毒进行实时荧光定量PCR检测的TaqMan探针(SVDV1-P)的5’端报告荧光基团为CY5，3’端荧光淬灭基团为BHQ2；

用于对水泡性口炎病毒进行实时荧光定量PCR检测的TaqMan探针(VSV1-P)的5’端报告荧光基团为HEX，3’端荧光淬灭基团为Eclipse；

所述探针的3’端经磷酸化处理。

3.用于对SVA、FMDV、SVDV和VSV进行多重实时荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于：

包括权利要求1或2所述的引物和TaqMan探针；

使用所述试剂盒时的50μL实时荧光定量PCR检测体系中所述引物和TaqMan探针的用量优选为：SVA1-F(10μM)1.5μL，SVA1-R(10μM)1.5μL，SVA1-P(10μM)1.5μL，FMDV1-F(10μM)0.5μL，FMDV1-R(10μM)0.5μL，FMDV1-P(10μM)1.5μL，SVDV1-F(10μM)1.5μL，SVDV1-R(10μM)1.5μL，SVDV1-P(10μM)1.5μL，VSV1-F(10μM)1.5μL，VSV1-R(10μM)1.5μL，VSV1-P(10μM)1.5μL。