[发明专利]一种快速检测花椒果皮中总酰胺含量的电化学方法

说明书

本发明属于食品检测领域，涉及一种快速检测花椒果皮中总酰胺含量的电化学方法；步骤为:将干燥花椒果皮粉碎过筛，干粉经无水乙醇提取、洗渣并液、稀释定容，得到花椒酰胺提取液；将提取液同电解质溶液混合配置成花椒酰胺检测工作液，其中解质溶液为含有乙醇的磷酸缓冲液；在多次加入标准物羟基‑α‑山椒素的过程中测定检测工作液的差分脉冲伏安曲线，绘制多次标准加入法工作曲线图，计算得出检测溶液中的总酰胺含量，换算得到花椒果皮样品中的总酰胺含量，即羟基‑α‑山椒素当量值；本发明解决了现有花椒总酰胺定量检测方法无法实现快速、低成本、准确性兼得的问题，本检测方法能够对花椒果皮中总酰胺含量进行快速、便携、准确检测。

技术领域

本发明属于食品检测领域，涉及一种快速检测花椒中总酰胺含量的电化学方法。

背景技术

花椒是中国传统“八大调味品”之一，因其具有独特的麻味而深受国民喜爱。引起花椒麻味的主要成分是链状多不饱和脂肪酸酰胺，统称花椒酰胺，其中羟基-α-山椒素(Hydroxyl-α-sanshool，α-SOH)、羟基-β-山椒素(Hydroxyl-α-sanshool，α-SOH)、羟基-γ-山椒素(Hydroxyl-α-sanshool，α-SOH)、羟基-ε-山椒素(Hydroxyl-α-sanshool，α-SOH)是最具代表性的酰胺类物质，占总酰胺含量的98％以上。

花椒酰胺含量的高低是衡量花椒品质的一个重要指标，也是花椒质量分级的重要依据。目前能够准确测量花椒酰胺含量的仪器检测方法是高效液相色谱法(HPLC)或高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)；专利文献201711217038.4中公开了一种利用HPLC设备检测花椒样品中的花椒酰胺含量的方法，但高效液相色谱仪器价格昂贵、操作程序较复杂、检测环境要求高且无法便携使用，这些局限性阻碍了该方法在行业中的大规模应用。

现有文献公开了一种花椒麻味素类物质含量快速检测方法包括：总酰胺浸膏的提取；酰胺转变为铵态氮；铵态氮含量测定。该方法属于间接测定花椒酰胺的一种滴定方法，其中总酰胺提取和酰胺转变为铵态氮等前处理过程总耗时长达2-6小时；而且滴定操作程序繁杂，滴定终点易出现误判。目前，尚未有公开方法能够同时实现花椒酰胺含量的快速、便携、准确、低成本检测。

发明内容

本发明要解决的技术问题是针对目前检测花椒样品中花椒酰胺方法操作复杂，成本较高等问题，提供一种操作简单、方便快速、检测成本低，能够实现对花椒原料中总花椒酰胺含量进行快速、准确、便携检测的电化学方法。

本发明解决上述技术问题的技术方案为：一种快速检测花椒中总酰胺含量的电化学方法，具体步骤如下：

(1)花椒果皮样品准备；

除去萎蔫或褐变的干燥花椒果皮，粉碎，经筛网筛选，得到花椒粉，-20℃条件下冷藏待检测；

(2)检测母液的制备；

称取步骤(1)所得的花椒粉，质量为W，加入无水乙醇A，震荡摇匀，常温条件下进行超声浸提，得到粗提液；将粗提液进行离心，收集上清液；收集滤渣另加入无水乙醇B，震荡后再次离心，收集上清液；如此重复，混合多次收集的上清液，即为检测母液，记录总体积V，冷藏待用；整个步骤在避光条件下操作；

(3)差分脉冲伏安法分析；

根据多次标准加入法的原理向样品检测溶液滴加一定体积的羟基-α-山椒素标准溶液(α-SOH)，随后利用三电极体系检测混合溶液中花椒酰胺物质的差分脉冲伏安曲线；

配置电解检测溶液，电解检测溶液的组成为无水乙醇和PBS缓冲液的混合溶液；吸取步骤(2)制备得到的检测母液，体积记为V₁，用电解检测溶液稀释，获得样品检测溶液A，体积记为V₂，利用三电极体系检测混合溶液中花椒酰胺物质的差分脉冲伏安曲线；