[发明专利]一种防治稻瘟病的生防制剂及其制备方法

说明书

本发明属于生物防治技术领域，具体涉及一种防治稻瘟病的生防制剂及其制备方法。本发明生防制剂包括以重量份计的以下成分：银杏内生真菌尖孢镰刀菌发酵液20‑40份、银杏叶提取物10‑20份和银杏外种皮提取物5‑15份；将尖孢镰刀菌经固体培养和液体培养制备得到的发酵液、银杏叶提取物和银杏外种皮提取物按所述重量份混合即得到所述生防制剂。本发明的生防制剂施用后可显著降低稻瘟病的发病率和病情指数，相对防效超过常规的化学防治，同时可以避免化学农药所产生的毒性和残留问题，绿色、环保、高效且不易产生抗药性，具有一定的应用前景。

技术领域

本发明属于生物防治技术领域，具体涉及一种防治稻瘟病的生防制剂及其制备方法。

背景技术

水稻是世界上重要的粮食作物之一，全球有半数以上人口以水稻为食。水稻的种植面积约占世界粮食总种植面积的20％。稻瘟病(病菌为Magnaporthe oryzae，其无性世代为Pyicularia oryzae)是全世界危害最严重水稻病害之一。水稻种植国家都无法避免稻瘟病造成的损失，稻瘟病不仅会降低水稻的产量，对水稻的质量也有很大的影响。有植病专家估计，目前我国每年因稻瘟病发病直接损失稻谷300万吨。

目前稻瘟病的防治措施主要包括抗病品种选育、药剂防治和栽培管理。选育抗病品种是一种经济环保的方式，但由于稻瘟病菌的遗传背景复杂，易变异，加上抗瘟品种单一化，主栽品种的遗传同质性，使抗病品种难以跟上致病性稻瘟病菌生理小种的变异速度，常常导致一个新的具有抗瘟性的水稻品种在大面积种植几年后丧失抗性，沦为感病品种。栽培管理难以形成系统性、规范性的技术体系，因此在实际生产中难以达到理想效果。为满足生产需要，药剂防治是防治稻瘟病的常用手段，但由于化学药剂的不合理运用，稻瘟病菌对生产上常用的几种主要杀菌剂(环唑、异稻瘟净)抗药性逐渐增强，使其防效不断下降，并且给生态环境和人类健康带来了不可忽视的严重危害。

发明内容

针对以上技术问题，本发明的目的是提供一种防治稻瘟病的生防制剂及其制备方法，既可抑制稻瘟病的发生，又可避免化学农药所产生的毒性和残留问题，绿色、环保、高效且不易产生抗药性。

本发明的目的是提供一种防治稻瘟病的生防制剂，其包括以重量份计的以下成分：银杏内生真菌尖孢镰刀菌发酵液20-40份、银杏叶提取物10-20份和银杏外种皮提取物5-15份；将尖孢镰刀菌经固体培养和液体培养制备得到的发酵液、银杏叶提取物和银杏外种皮提取物按所述重量份混合即得到所述生防制剂。

优选地，所述生防制剂包括以重量份计的以下成分：银杏内生真菌尖孢镰刀菌发酵液30份、银杏叶提取物10份和银杏外种皮提取物15份。

本发明的另一目的是提供一种防治稻瘟病的生防制剂的制备方法，其包括以下步骤：

(1)将尖孢镰刀菌接种于PDA固体斜面培养基上培养24-48h，待菌株生长旺盛，挑取菌丝接种于PDB液体培养基，于恒温振荡培养箱中发酵培养5-7d，得到所述尖孢镰刀菌发酵液；

(2)将银杏叶干燥后粉碎过40-60目筛，再放入提取罐中，同时加入体积浓度为60-80％的乙醇提取2-3次，每次提取60-70min，合并提取液；将提取液减压蒸馏至原体积的1/5-1/10，得到浓缩液，向浓缩液中加入等体积的纯化水，沉淀12-15h，取上清液；将上清液减压干燥后上酸性氧化铝柱，用含乙酸的乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压蒸馏得到流浸膏，流浸膏减压干燥，得到所述银杏叶提取物；

(3)将银杏外种皮采用90-99℃热水煎煮，每次1-2h，共煎煮2-3次，料液比为1:6-12(W/V)，将煎煮液分别过滤，合并滤液减压浓缩，将浓缩液转移至容器中，将容器置于磁力搅拌器的基座上，将乙醇缓慢滴加入浓缩液中，使乙醇终浓度达到60-80％(V/V)，在加入乙醇的同时开动磁力搅拌器搅拌，静置后将沉淀物再用体积浓度为80-90％的乙醇洗涤3-5次后真空干燥，得到所述银杏外种皮提取物；