[发明专利]一种防治稻瘟病的生防制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种防治稻瘟病的生防制剂，其特征在于，包括以重量份计的以下成分：银杏内生真菌尖孢镰刀菌发酵液20-40份、银杏叶提取物10-20份和银杏外种皮提取物5-15份；将尖孢镰刀菌经固体培养和液体培养制备得到的发酵液、银杏叶提取物和银杏外种皮提取物按所述重量份混合即得到所述生防制剂。

2.根据权利要求1所述的一种防治稻瘟病的生防制剂，其特征在于，所述生防制剂包括以重量份计的以下成分：银杏内生真菌尖孢镰刀菌发酵液30份、银杏叶提取物10份和银杏外种皮提取物15份。

3.根据权利要求1或2所述的一种防治稻瘟病的生防制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将尖孢镰刀菌接种于PDA固体斜面培养基上培养24-48h，待菌株生长旺盛，挑取菌丝接种于PDB液体培养基，于恒温振荡培养箱中发酵培养5-7d，得到所述尖孢镰刀菌发酵液；

(2)将银杏叶干燥后粉碎过40-60目筛，再放入提取罐中，同时加入体积浓度为60-80％的乙醇提取2-3次，每次提取60-70min，合并提取液；将提取液减压蒸馏至原体积的1/5-1/10，得到浓缩液，向浓缩液中加入等体积的纯化水，沉淀12-15h，取上清液；将上清液减压干燥后上酸性氧化铝柱，用含乙酸的乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压蒸馏得到流浸膏，流浸膏减压干燥，得到所述银杏叶提取物；

(3)将银杏外种皮采用90-99℃热水煎煮，每次1-2h，共煎煮2-3次，料液比为1:6-12(W/V)，将煎煮液分别过滤，合并滤液减压浓缩，将浓缩液转移至容器中，将容器置于磁力搅拌器的基座上，将乙醇缓慢滴加入浓缩液中，使乙醇终浓度达到60-80％(V/V)，在加入乙醇的同时开动磁力搅拌器搅拌，静置后将沉淀物再用体积浓度为80-90％的乙醇洗涤3-5次后真空干燥，得到所述银杏外种皮提取物；

(4)将所述尖孢镰刀菌发酵液、所述银杏叶提取物和所述银杏外种皮提取物按重量份混合均匀即得所述生防制剂。

4.根据权利要求3所述的一种防治稻瘟病的生防制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中发酵培养时的温度为26-28℃，转速为180-200r/min。

5.根据权利要求3所述的一种防治稻瘟病的生防制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)得到的尖孢镰刀菌发酵液中尖孢镰刀菌的菌体浓度≥1×10⁷cfu/ml。

6.根据权利要求3所述的一种防治稻瘟病的生防制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)提取罐中乙醇的用量为银杏叶重量的4-8倍。

7.根据权利要求3所述的一种防治稻瘟病的生防制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中含乙酸的乙醇为体积浓度为80-90％的乙醇和体积百分比0.1-0.5％的乙酸组成。

8.根据权利要求3所述的一种防治稻瘟病的生防制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中磁力搅拌器的搅拌温度为20-30℃，转速为1400-1800r/min。