[发明专利]一种用于动物源性产品中抗病毒类药物残留的检测方法

说明书

本发明属于食品安全检测领域。目的是提供一种用于动物源性产品中15种抗病毒类药物残留的检测方法。该方法应具备选择性好、灵敏度高、检测时间短的特点，以提高检测效率。技术方案是：一种用于动物源性产品中抗病毒类药物残留的检测方法，依照如下步骤进行：1)样品预处理；2)标准储备液的配置；3)混合标准储备液的配置；4)基质工作液的配置；5)待测液的检测。

技术领域

本发明属于食品安全检测领域，尤其涉及一种动物源性食品中抗病毒类药物残留的检测方法。

背景技术

抗病毒药物是一类用于预防和治疗病毒感染的药物，其应用广泛，对人和动物的健康有着非常重要的作用，在感染细胞或动物体内可抑制病毒的复制和繁殖，在体外可抑制病毒复制酶。目前较常用的抗病毒药物主要有核苷类的阿昔洛韦、奥司他韦、扎那米韦、拉米夫定，非核糖苷类的阿比多尔，三环胺类金刚烷胺、金刚乙胺，以及非核苷类异环胺类小分子免疫反应调节剂咪喹莫特等。畜禽的病毒性疾病传播速度非常快，动物易感染且发病率高，这使得病毒感染导致的疾病成为兽医临床上对畜禽动物危害最为严重的传染病之一，特别是一些高致病性病毒的流行，不仅给畜禽的生命健康带来了威胁，也给养殖户造成了巨大的损失，临床上人用的抗流感病毒药物金刚烷胺、利巴韦林等药物对动物常见的病毒性疾病也有一定的预防和治疗效果，由于其价格低廉，在禽流感病毒爆发季节，这些药物曾广泛运用于畜禽养殖业，将人用抗病毒药物移作兽用，因缺乏科学规范、安全有效的实验数据，长期使用这些药物会导致动物中毒，形成药物残留、免疫抑制等问题，还可能病毒菌株产生变异，危害人类健康。

目前畜禽产品中多种抗病毒类药物残留的测定方法还较少。对于抗病毒药物的检测方法主要有光谱法、电位滴定法、高效液相色谱法(HPLC法)、气相色谱法(GC法)、液相色谱质谱法(HPLC-MS/MS法)等。光谱法和电位滴定法无法实现多残留的检测，金刚烷胺、金刚乙胺等分子结构中缺少发色集团，无法满足液相色谱法测定要求，气相色谱法缺乏专一性和灵敏度较低且无法提供结构信息，大多需要衍生化处理、方法繁琐，干扰多，不利于多残留分析。相比之下液相色谱质谱法具有高效分离和多组分定性、定量的优点，已经成为分析抗病毒类药物残留检测的主要分析方法。目前检测方法仍以单个抗病毒药物的检测为主，因此样品需要重复处理，分别检测，耗时费力。

发明内容

本发明的目的是克服上述背景技术的不足，提供一种用于动物源性产品中15种抗病毒类药物残留的检测方法。该方法应具备选择性好、灵敏度高、检测时间短的特点，以提高检测效率。

为实现上述目的，本方法提供了如下技术方案：

一种用于动物源性产品中抗病毒类药物残留的检测方法，依照如下步骤进行：

1)样品预处理：称取2-5g样品于50mL离心管中，加入10mL1％浓度的酸化乙腈溶液，0.5-1.0g氯化钠、0.2-0.5g无水硫酸镁，搅拌、超声提取后，将提取液置于冰箱中冷冻；接着离心处理，取2mL上清液经PRiME HLB固相萃取小柱净化后，过0.22μm有机滤膜后，待用；

2)标准储备液的配置：分别称取金刚烷胺等15种抗病毒药物标准品10mg，分别用甲醇溶解定容100.0mL；

3)混合标准储备液的配置：分别吸取1.00mL各标准储备液(100μg/mL)于同一100mL容量瓶中，混匀后用乙腈定容，得到1.00μg/mL混合标准溶液；

4)基质工作液的配置：按样品预处理方法对空白阴性样品进行处理后，用空白阴性样品基质溶液稀释混合标准储备液，制成不同浓度的混合标准工作液；

5)待测液的检测：运用HPLC-MS/MS，在质谱ESI源下正离子模式下测定，外标法定量。

超高效液相色谱-三重四极杆质谱仪色谱条件为：