[发明专利]一种用于动物源性产品中抗病毒类药物残留的检测方法

权利要求书

1.一种用于动物源性产品中抗病毒类药物残留的检测方法，依照如下步骤进行：

1)样品预处理：称取2-5g样品于50mL离心管中，加入10mL1％浓度的酸化乙腈溶液，0.5-1.0g氯化钠、0.2-0.5g无水硫酸镁，搅拌、超声提取后，将提取液置于冰箱中冷冻；接着离心处理，取2mL上清液经PRiME HLB固相萃取小柱净化后，过0.22μm有机滤膜后，待用；

2)标准储备液的配置：分别称取15种抗病毒药物标准品10mg，分别用甲醇溶解定容100.0mL；

3)混合标准储备的配置：分别吸取1.00mL各标准储备液于同一100mL容量瓶中，混匀后用乙腈定容，得到1.00μg/mL混合标准溶液；

4)基质工作液的配置：按样品预处理方法对空白阴性样品进行处理后，用空白阴性样品基质溶液稀释混合标准储备液，制成不同浓度的混合标准工作液；

5)待测液的检测：运用HPLC-MS/MS，在质谱ESI源下正离子模式下测定，外标法定量；

超高效液相色谱-三重四极杆质谱仪色谱条件为：

色谱柱：资生堂HILIC色谱柱2.0×100mm,5μm；流速：0.35mL/min；进样量：5μL；柱温：35℃； 溶液A—10mmol/L乙酸铵水溶液含0.1％甲酸，B--乙腈含0.1％甲酸，梯度洗脱程序：0min，95％B％，0min-2.00min，95％B％，2.00min–4.00min，95％-80％B％，4.00min-5.00min，80％B％，5.00min–5.5min，80％-95％B％，5.50min–11.00min,95％B％；

超高效液相色谱-三重四极杆质谱仪质谱条件为：

离子源：电喷雾离子源(ESI源)

喷雾压力：40psi

干燥气流速：10L/min

干燥气温度：350℃

毛细管电压：4000V

监测模式：正离子监测模式；

所述步骤4)中，混合标准工作液浓度依次为：2.0ng/mL、4.0ng/mL、8.0ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、40.0ng/mL；

所述抗病毒类药物是：金刚烷胺、金刚乙胺、美金刚、吗啉胍、阿比多尔、利巴韦林、奥司他韦、泛昔洛韦、阿昔洛韦、喷昔洛韦、更昔洛韦、咪喹莫特、拉米夫定、齐多夫定、奈韦拉平。

2.根据权利要求1所述的用于动物源性产品中抗病毒类药物残留的检测方法，其特征在于：所述步骤1)中的搅拌是涡旋处理，时间1-3min；超声提取时间为15-25min。

3.根据权利要求2所述的用于动物源性产品中抗病毒类药物残留的检测方法，其特征在于：所述步骤1)中的冷冻是在-20℃冰箱中冷冻10-20min。

4.根据权利要求3所述的用于动物源性产品中抗病毒类药物残留的检测方法，其特征在于：所述步骤1)中的离心处理的速度为4000r/min，时间是3-8min。

5.根据权利要求4所述的用于动物源性产品中抗病毒类药物残留的检测方法，其特征在于：所述步骤2)中的甲醇溶解定容时，遇有溶解性较差的标准物质可先用N-N二甲基甲酰胺溶解后，再用甲醇定容。