[发明专利]一种基于改性胶原的软组织粘合剂及其制备方法

权利要求书

1.一种基于改性胶原的软组织粘合剂，其特征在于，其原料组成包括：胶原、聚赖氨酸（E-PL）、没食子酸（GA）与氧化剂；其制备方法，包括以下步骤：

a）氮气保护下，在氨基被封闭的胶原溶液中加入没食子酰化聚赖氨酸，再加入EDC/NHS，使没食子酰化聚赖氨酸的部分剩余氨基与胶原羧基发生反应，反应结束后，透析、冷冻干燥，得到精制改性胶原；

b）将改性胶原溶解于去离子水中，制得浓度为40mg/mL~400mg/mL的改性胶原溶液，称为A液，接着将A液与氧化剂按体积比1~5：1混合均匀制得上述软组织粘合剂。

2.根据权利要求1所述的一种基于改性胶原的软组织粘合剂，其特征在于：所述氧化剂选用浓度为30%的双氧水与16.68%高碘酸钠溶液中的任意一种。

3.根据权利要求1所述的一种基于改性胶原的软组织粘合剂，其特征在于：步骤a）中所述氨基被封闭的胶原溶液与没食子酰化聚赖氨酸的固含量比为2.4~7.2：1；EDC与氨基被封闭的改性胶原的固含量的质量比为2~10%。

4.根据权利要求1所述的一种基于改性胶原的软组织粘合剂，其特征在于：步骤a）中所述氨基被封闭的胶原溶液的制备方法如下：

在氮气保护下，在1~10mg/mL胶原溶液中加入过量没食子酸-NHS酯，其中胶原与没食子酸-NHS酯的固含量比例为2.4~7.2：1，使胶原氨基充分与没食子酸-NHS酯反应1h~5h，得到氨基被封闭的胶原溶液。

5.根据权利要求1所述的一种基于改性胶原的软组织粘合剂，其特征在于：所述胶原的提取方法如下：

采集制革准备工段中富含胶原的边角料，经绞碎、清洗后，充分进行脱灰处理，采用醋酸-胃蛋白酶结合法，在不高于10℃条件下振荡提取，经离心、盐析、溶解、透析及冷冻干燥处理后，得到精制天然皮胶原。

6.根据权利要求4所述的一种基于改性胶原的软组织粘合剂，其特征在于：所述没食子酸-NHS酯的制备方法如下：

称取GA、EDC、NHS，将三者加入无水DMF中，氮气保护反应，反应1~5小时后，加入二氯甲烷溶液，使产物逐渐从混合溶液中析出，离心除去上清液，剩下的沉淀物重复洗涤2~3次、真空干燥后得到精制没食子酸-NHS酯。

7.根据权利要求6所述的一种基于改性胶原的软组织粘合剂，其特征在于：所述EDC与GA的摩尔比例为0.5~2：1；NHS与GA的摩尔比例为0.5~2：1。

8.根据权利要求1所述的一种基于改性胶原的软组织粘合剂，其特征在于：步骤a）中所述没食子酰化聚赖氨酸的制备方法如下：

在氮气保护下，将E-PL与GA溶解于MES缓冲液中，待E-PL与GA完全溶解后，滴入含有EDC与NHS的MES缓冲液，继续搅拌2~8小时，反应结束后，透析、冷冻干燥，得到没食子酰化聚赖氨酸。

9.根据权利要求8所述的一种基于改性胶原的软组织粘合剂，其特征在于：所述E-PL氨基与GA羧基的摩尔比例为0.25~1：1；所述MES缓冲液的浓度为0.05mol/L，pH=5.5；所述EDC与GA羧基的摩尔比例为0.5~2：1；所述NHS羟基与GA羧基的摩尔比例为0.5~2：1。