[发明专利]一种环境因子对钉螺酶活力影响的实验方法

权利要求书

1.一种环境因子对钉螺酶活力影响的实验方法，其特征在于，

收集钉螺软体组织并称重；将软体组织放入离心管中，并置入液氮内，在-80℃冰箱保存；采用ELISA法在不同环境温度、pH值和盐度调节下分别测定软体组织HK和LDH活力。

2.如权利要求1所述的环境因子对钉螺酶活力影响的实验方法，其特征在于，试剂采用己糖激酶和乳酸脱氢酶酶联免疫分析试剂盒。

3.如权利要求2所述的环境因子对钉螺酶活力影响的实验方法，其特征在于，在冰盘上压碎并剔除螺壳；取软体组织用滤纸吸干组织外水分，收集软体组织并称重，放入1.5ml离心管中，并置入液氮内，在-80℃超低温冰箱保存，备用。

4.如权利要求3所述的环境因子对钉螺酶活力影响的实验方法，其特征在于，测定酶活力时，取0.05g组织，加入0.45ml PBS缓冲液，在冰水浴中充分碾磨软体组织，碾磨后用台式低温高速离心机以3500r/min离心，10分钟后取上清液，制成10％组织匀浆后分装备用。

5.如权利要求4所述的环境因子对钉螺酶活力影响的实验方法，其特征在于，按照HK和LDH酶联免疫分析试剂盒上的步骤进行操作，依序读取各孔的吸光度值，将样品的吸光度值带入标准曲线直线回归方程，计算出样品的浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的试剂浓度。

6.如权利要求5所述的环境因子对钉螺酶活力影响的实验方法，其特征在于，数据分析采用SPSS18.0统计软件，结果以来表示，各组间数据两样本均数的比较采用t检验，多个样本均数比较采用方差分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

7.如权利要求6所述的环境因子对钉螺酶活力影响的实验方法，其特征在于，实验用水为天然江水，不同温度对钉螺HK活力的影响有统计学意义，HK活力在1℃～40℃温度范围内，随温度的上升呈先上升后下降的趋势，温度为28℃时酶活力最高，随着温度升高，钉螺HK活力增强，温度进一步升高，HK的活力逐渐降低；LDH的活力在各温度水平之间的差异有统计学意义，在1℃～40℃温度范围内，LDH的活力随温度上升呈先上升后下降再上升的变化规律，但总体呈上升趋势，表明随着温度升高，钉螺体内无氧呼吸增强。

8.如权利要求7所述的环境因子对钉螺酶活力影响的实验方法，其特征在于，实验用水为天然江水，在20℃温度下，随着pH值升高，HK活力总体呈下降趋势，LDH的活力呈现先上升后下降的变化规律，但不同pH值水平之间HK和LDH的活力变化均无统计学意义。

9.如权利要求8所述的环境因子对钉螺酶活力影响的实验方法，其特征在于，实验用水为天然江水，在20℃温度下，盐度对钉螺HK和LDH活力的影响均有统计学意义，在0.3～1.8盐度范围内，钉螺HK和LDH活力整体均呈下降趋势。