[发明专利]一种用于核酸原位合成的固相载体及其制备方法

权利要求书

1.一种用于核酸原位合成的固相载体的制备方法，其中，所述制备方法包括以下步骤：

(1)利用氨基化修饰试剂对固相基底进行第一氨基化处理，得到第一氨基化的固相基底；

(2)利用长链接头修饰试剂对所述第一氨基化的固相基底进行修饰，得到长链接枝的固相基底，其中，所述接头修饰试剂具有以下结构：

其中，R₁为羧基，R₂为氨基或卤素，另外R₁与R₂之间的碳原子数n≧6；

(3)利用25％-28％的浓氨水在室温下与所述长链接枝的固相基底混匀反应，从而进行第二氨基化处理，得到第二氨基化的固相基底；以及

(4)通过脱水缩合反应将带有保护基的可裂解连接物连接至所述第二氨基化的固相基底，得到固相载体，其中，所述可裂解连接物有如下式所示的结构：

其中，R₃表示碱基，R₄表示氢原子、羟基、卤素原子、具有1-20个碳原子的烷氧基、被叔丁基二甲基硅烷基保护的羟基。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其中，所述固相基底为硅材质，或聚苯乙烯，或Fe₃O₄。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其中，所述硅材质为玻璃、石英或陶瓷。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的制备方法，其中，单位面积的固相基底所需要的第一氨基化修饰试剂的浓度为0.1％-30％。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其中，单位面积的固相基底所需要的第一氨基化修饰试剂的浓度为1％-10％。

6.根据权利要求1-3中任一项所述的制备方法，其中，所述固相基底的形状为微球，并且其中，所述微球的直径为1μm–1000μm。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其中，所述微球的直径为为50μm-150μm。

8.根据权利要求6所述的制备方法，其中，所述微球为多孔微球，并且其中，所述多孔微球的孔径为

9.根据权利要求8所述的制备方法，其中，所述多孔微球的孔径为

10.根据权利要求1-3中任一项所述的制备方法，其中，相对于微球状的固相基底的质量，所述接头修饰试剂的用量为100μmol/g-100mmol/g。

11.根据权利要求10所述的制备方法，其中，相对于微球状的固相基底的质量，所述接头修饰试剂的用量为500μmol/g-5mmol/g。

12.根据权利要求1-3中任一项所述的制备方法，其中，对于片状固相基底，单位玻片表面积所需的接头修饰试剂的用量为10μmol-10mmol，其中“单位玻片面积”是指一张25mm×75mm的标准载玻片的表面积。

13.根据权利要求12所述的制备方法，其中，对于片状固相基底，单位玻片表面积所需的接头修饰试剂的用量为50μmol-5mmol。

14.根据权利要求1-3中任一项所述的制备方法，其中，相对于微球状的固相基底的质量，所述可裂解连接物的负载量为1-150μmol/g。

15.根据权利要求14所述的制备方法，其中，相对于微球状的固相基底的质量，所述可裂解连接物的负载量为1-100μmol/g。

16.一种根据权利要求1-15中任一项所述的制备方法制备的固相载体。