[发明专利]一种人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒在审
| 申请号： | 201910643854.4 | 申请日： | 2019-07-17 |
| 公开（公告）号： | CN112239793A | 公开（公告）日： | 2021-01-19 |
| 发明（设计）人： | 郑超;吴祚达;陈素华 | 申请（专利权）人： | 新开源博畅（武汉）生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6806;C12R1/93 |
| 代理公司： | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人： | 冯子玲 |
| 地址： | 430205 湖北省武汉市东湖开*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 乳头 病毒 核酸 检测 试剂盒 | ||
1.一种人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒包括SNP位点的两对上下游扩增引物及扩增模板提取试剂、DNA聚合酶、dNTPs和缓冲液，第一轮扩增产物长于第二轮扩增产物且包含第二轮扩增产物，第二轮扩增以第一轮扩增产物为模板进行，其中第一轮扩增引物如序列表SEQ ID NO：1～2所示，第二轮扩增引物如序列表SEQ ID NO：3～4所示。
2.根据权利要求1所述的人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒，其特征在于：所述第二轮扩增体系的体积是第一轮扩增体系体积的1.5～2.5倍，扩增引物加入量等比例变化，模板加入量相同。
3.根据权利要求1所述的人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒，其特征在于，所述第一轮PCR扩增体系为25μL，第二轮扩增体系为50μL。
4.根据权利要求1所述的人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒，其特征在于，第一轮扩增反应程序为：以提取的基因组DNA为模板，94℃2min；94℃15sec，50℃20sec，72℃2min，共35个循环，72℃10min，4℃保温。
5.根据权利要求1所述的人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒，其特征在于，第二轮扩增反应程序为：以第一轮产物为模板，94℃4min；94℃15sec，55℃20sec，72℃2min，共30个循环，72℃10min，4℃保温。
6.根据权利要求1所述的人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒，其特征在于，两轮PCR反应中均采用Primix Taq酶，第一轮中加入10μL，第二轮中加入25μL。
7.根据权利要求1所述的人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括基因组DNA回收试剂。
8.根据权利要求1所述的人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒，其特征在于：所述DNA聚合酶为Primix Taq酶。
9.一种采用根据权利要求1～8任一项所述的人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒的检测方法，其特征在于，所述检测方法针对第二轮扩增产物进行基因测序，第二轮扩增产物以第一轮扩增产物作为模板进行扩增。
10.一种人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒的应用，其特征在于，所述检测试剂盒为根据权利要求1～9任一项所述的人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒。
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