[发明专利]一种CD47单克隆抗体冻干粉制剂及其制备工艺

说明书

本发明属于蛋白质和多肽药物技术领域，具体涉及一种CD47单克隆抗体冻干粉制剂。该冻干粉制剂包含CD47单克隆抗体、右旋糖酐、β‑环糊精、保护剂、增溶剂和缓冲剂，通过本发明的处方及冻干工艺进行冻干后得到的CD47单克隆抗体稳定性较高，适合大规模生产，且利于贮藏和运输。

技术领域

本发明属于蛋白质和多肽药物技术领域，具体涉及一种CD47单克隆抗体冻干粉制剂。

背景技术

CD47也称为整联蛋白相关蛋白(IAP)、卵巢癌抗原OA3、Rh-相关抗原和MER6，是一种属于免疫球蛋白超家族的多跨的跨膜受体。它的表达和活性已经与许多疾病和失调相关联。它是一种广泛表达的跨膜糖蛋白，并带有一个免疫球蛋白样结构域和五个跨膜区，其作为SIRPα的细胞配体，通过信号调节蛋白α(SIRPα)的NH 2末端的V样结构域与SIRPα结合。SIRPα主要表达于骨髓细胞，包括巨噬细胞，粒细胞，树突状细胞(DC)，肥大细胞，和它们的前体细胞，包括造血干细胞。

CD47在肿瘤免疫逃避机制中扮演了至关重要的角色。现有研究结果已经明确了CD47参与肿瘤的发生发展，并视其为肿瘤免疫治疗的重要靶点。不同的研究表明，几乎所有的肿瘤细胞和组织都高表达CD47。肿瘤细胞表面高表达的CD47通过与巨噬细胞表面SIRPα结合，释放“不要吃我”的信号，导致肿瘤组织浸润区的巨噬细胞不但同肿瘤细胞和谐相处，而且还会通过促进肿瘤内血管增殖，抑制效应T细胞发挥作用，促进肿瘤细胞扩增和生长。

目前已经有报道了多个抗CD47抗体，例如美国专利US2015/0183874A1报道了衍生自B6H12的人IgG1型嵌合单克隆抗体和通过CDR移植产生的人源化B6H12抗体，其相比较于已知抗体具有更低的免疫原性。美国专利US 9045541报道了一种不显著引起血凝反应的抗CD47抗体，并且该抗体与己知抗体相比，在肿瘤模型中显著有效，例如提高巨噬细胞吞噬肿瘤细胞的能力。中国专利CN201780003451报道的新的CD47抗体在人体内具有低免疫原性，且引起低水平或不引起血细胞清除或红细胞凝聚。

由于CD47抗体蛋白有容易聚集的倾向。在制备成注射剂贮存过程中，其稳定性极易受到影响，因此考虑将其做成冻干制剂。目前对于CD47单克隆抗体的冻干制剂鲜有报道，因此，需要开发一种稳定的CD47单克隆抗体冻干制剂来满足临床用药需求。

生物冻干制品的整个冻干过程中常常会受各种应力作用直接或间接导致蛋白质药物不稳定的因素。优良的蛋白保护剂不仅能够在冻干过程中对蛋白质药物起到很好的保护作用，而且能够对成品贮藏期内的蛋白质变性起到抑制作用。目前，还没有一种通用的冻干保护剂，任何一种新药生物制剂的冻干，选择合适的冻干赋形剂都是一项极为重要的工作。

发明内容

本发明的目的在于提供一种CD47单克隆抗体的冻干制剂，该制剂配方简单，蛋白体系稳定，便于大规模生产、贮存和运输，临床给药方便。采用本发明的处方冻干CD47单克隆抗体，既可以提高蛋白的玻璃转化温度，又能抑制各种组份在冻干过程中的结晶，从而提高其稳定性。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案如下：

一种CD47单克隆抗体冻干粉制剂，包括CD47单克隆抗体、右旋糖酐、β-环糊精、保护剂、增溶剂和缓冲剂。

所述保护剂选自γ-氨基丁酸、门冬氨酸、山梨醇、甘露醇中的一种。

优选地，所述保护剂为γ-氨基丁酸。

所述增溶剂为非离子型表面活性剂。

优选的，所述非离子型表面活性剂为聚山梨酯。

进一步优选的，所述增溶剂选自吐温20或吐温80中的一种。

所述缓冲剂为组氨酸/醋酸。

所述CD47单克隆抗体冻干粉制剂在冻干前的溶液中包含如下含量的组份：