[发明专利]一种CD47单克隆抗体制剂及其制备方法

说明书

本发明属于蛋白质和多肽药物技术领域，具体涉及一种CD47单克隆抗体制剂及其制备方法。该制剂包含CD47单克隆抗体、氨基酸、稳定剂、表面活性剂和缓冲剂。通过本发明的处方及制备工艺得到的CD47抗体注射液，聚体和小分子片段含量少，稳定性较高，适合大规模生产，且利于贮藏和运输。

技术领域

本发明属于蛋白质和多肽药物技术领域，具体涉及一种CD47单克隆抗体制剂及其制备方法。

背景技术

CD47也称为整联蛋白相关蛋白(IAP)、卵巢癌抗原OA3、Rh-相关抗原和MER6，是一种属于免疫球蛋白超家族的多跨的跨膜受体。它的表达和活性已经与许多疾病和失调相关联。它是一种广泛表达的跨膜糖蛋白，并带有一个免疫球蛋白样结构域和五个跨膜区，其作为SIRPα的细胞配体，通过信号调节蛋白α(SIRPα)的NH₂末端的V样结构域与SIRPα结合。SIRPα主要表达于骨髓细胞，包括巨噬细胞，粒细胞，树突状细胞(DC)，肥大细胞，和它们的前体细胞，包括造血干细胞。

CD47在肿瘤免疫逃避机制中扮演了至关重要的角色。现有研究结果已经明确了CD47参与肿瘤的发生发展，并视其为肿瘤免疫治疗的重要靶点。不同的研究表明，几乎所有的肿瘤细胞和组织都高表达CD47。肿瘤细胞表面高表达的CD47通过与巨噬细胞表面SIRPα结合，释放“不要吃我”的信号，导致肿瘤组织浸润区的巨噬细胞不但同肿瘤细胞和谐相处，而且还会通过促进肿瘤内血管增殖，抑制效应T细胞发挥作用，促进肿瘤细胞扩增和生长。

目前已经有报道了多个抗CD47抗体，例如美国专利US2015/0183874A1报道了衍生自B6H12的人IgG1型嵌合单克隆抗体和通过CDR移植产生的人源化B6H12抗体，其相比较于已知抗体具有更低的免疫原性。美国专利US 9045541报道了一种不显著引起血凝反应的抗CD47抗体，并且该抗体与己知抗体相比，在肿瘤模型中显著有效，例如提高巨噬细胞吞噬肿瘤细胞的能力。中国专利CN201780003451报道的新的CD47抗体在人体内具有低免疫原性，且引起低水平或不引起血细胞清除或红细胞凝聚。

由于CD47抗体蛋白有容易聚集的倾向。在制备成注射剂贮存过程中，其稳定性极易受到影响。目前对于CD47单克隆抗体制剂鲜有报道，因此，需要开发一种稳定的CD47单克隆抗体制剂来满足临床用药需求。

发明内容

基于现有技术的不足，本发明提供了一种CD47单克隆抗体制剂，在CD47抗体溶液中加入氨基酸和稳定剂后，可以使其包围在抗体蛋白周围，使大分子物质的运动受阻，维持蛋白质分子的空间结构，阻止蛋白分子的沉淀，从而增加蛋白稳定性。加入表面活性剂，进一步减少制剂中的抗体的聚集，颗粒在制剂中的形成及吸附等问题，该制剂配方简单，蛋白体系稳定，便于大规模生产、贮存和运输，临床给药方便。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案具体如下：

本发明所述的CD47单克隆抗体是指能够特异性结合CD47的单克隆抗体。一种CD47单克隆抗体制剂，其特征在于，所述制剂包含CD47单克隆抗体、缓冲剂、氨基酸、稳定剂、表面活性剂。

所述氨基酸为谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、酪氨酸、色氨酸中的一种或几种。

所述氨基酸为谷氨酸和天冬氨酸的混合物。

所述谷氨酸和天冬氨酸的摩尔比为1:2-5。

所述稳定剂为蔗糖、海藻糖、甘露醇、苏糖醇中的一种或几种。

优选的，所述稳定剂为苏糖醇。

所述表面活性剂为非离子表面活性剂。

优选的，所述非离子表面活性剂为聚山梨酯，泊洛沙姆中的一种。

进一步优选的，所述非离子表面活性剂为聚山梨酯80。