[发明专利]一种液基薄层细胞制片的方法在审
| 申请号： | 201910631022.0 | 申请日： | 2019-07-12 |
| 公开（公告）号： | CN110398401A | 公开（公告）日： | 2019-11-01 |
| 发明（设计）人： | 赵路;陈水煜;汤哲文;贾磊;钟娟 | 申请（专利权）人： | 上海晶铸生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N1/28 | 分类号： | G01N1/28 |
| 代理公司： | 上海段和段律师事务所 31334 | 代理人： | 陈少凌;郭国中 |
| 地址： | 201100 上海市闵行区闵*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 样本 巴氏染色 细胞制片 样本处理 沉降仓 基薄层 板条 样杯 制片 种液 预处理 红细胞去除 白细胞 静置沉降 缓冲液 玻片 磁珠 对转 放入 封片 加样 上机 去除 冲洗 优化 | ||
1.一种液基薄层细胞制片的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
S1、将预处理后的样本逐个放入板条，并将板条逐个上机；
S2、转移样本至转样杯；对转样杯中的样本进行样本处理；
S3、处理后的样本加样至沉降仓，静置沉降，吸去上清；
S4、巴氏染色；
S5、将巴氏染色后的玻片转移出沉降仓，液体封片。
2.如权利要求1所述的液基薄层细胞制片的方法，其特征在于，步骤S2中，所述样本处理包括37℃孵育，反应体系切换，冲洗红细胞去除，换PBS缓冲液，加入磁珠去除白细胞干扰。
3.如权利要求2所述的液基薄层细胞制片的方法，其特征在于，所述37℃孵育的时间为8-12min。
4.如权利要求2所述的液基薄层细胞制片的方法，其特征在于，所述反应体系切换为生理盐水体系。
5.如权利要求2所述的液基薄层细胞制片的方法，其特征在于，所述冲洗红细胞去除采用的冲洗液为生理盐水；冲洗时间为3-5min。
6.如权利要求1所述的液基薄层细胞制片的方法，其特征在于，步骤S1中，所述预处理包括样本整理、摆放、扫码。
7.如权利要求1所述的液基薄层细胞制片的方法，其特征在于，步骤S4中，所述巴氏染色包括如下步骤：
A1、步骤S3中样本静置沉降，吸去上清后置入无水乙醇或异丙醇8-12秒；
A2、置入PH7.8 tris缓冲液3-8秒；
A3、置入苏木素染液2-6分钟；
A4、置入PH7.8 tris缓冲液0.8-1.2分钟；
A5、置入无水乙醇或异丙醇，重复2遍；
A6、置入EA-OG混合染液2-6分钟；
A7、置入无水乙醇或异丙醇8-12秒，重复2遍；
A8、置于二甲苯8-12秒，重复2遍；
A9、湿封片。
8.如权利要求1所述的液基薄层细胞制片的方法，其特征在于，步骤S5中，巴氏染色后的玻片转移出沉降仓后，自动清洁臂清洗沉降仓。
9.如权利要求1所述的液基薄层细胞制片的方法，其特征在于，步骤S5中，所述的液体封片采用的封片试剂为紫外光固化胶。
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