[发明专利]一种干燥细胞模型及其建立方法以及应用

说明书

一种干燥细胞模型建立方法，包括以下步骤：细胞培养步骤，于细胞培养板上在控温、控湿条件下进行培养；细胞干燥步骤，吸干经细胞培养步骤后的细胞培养液，在风速小于0.1m/s、相对湿度在10.0％及以下，25℃±5℃的条件下暴露细胞；再培养步骤，在控温、控湿条件下对细胞进行再培养，使经干燥处理的细胞活力降至45％‑70％，其中，细胞活力是指由WST‑1方法测得，将在给定条件下进行孵育后的未经干燥处理组的吸光度值定义为100％，在给定条件下对经干燥处理组进行同样的孵育后，测定其吸光度值，得到经干燥处理组的吸光度值/未经干燥处理组的吸光度值的检测结果，并以百分比表示的所述检测结果；此方法可以用于评价化妆品及其原料的干燥保护和/或干燥修复性能。

技术领域

本发明涉及一种对化妆品及其原料的保湿性进行评价的方法，特别涉及一种在细胞水平评价化妆品及其原料保湿性以及对干燥损伤的防护与修复功效的方法。

背景技术

保湿是皮肤护理的基本诉求，保湿功效是化妆品最基本的功能，因而宣称保湿的化妆品在整个化妆品品类中占有最高的比例。研究者们也在不断推出新的作用机制、新的保湿功效评价方法。《化妆品保湿功效评价指南》是国内首个关于化妆品功效评价的行业标准，对规范化妆品市场秩序，提升化妆品质量水平，起到促进作用。该方法是用电容法测定人皮肤角质层含水量以及用经皮水分散失来评价护肤品的保湿性。此方法需要专用仪器，耗费大量人力资源，且对测试环境温度及相对湿度要求严格。

皮肤细胞作为化妆品所接触人体的第一道屏障，从细胞水平来测定保湿性是一种亟待开发的保湿性评价方法。目前皮肤细胞已有商业化的细胞株方便购买，易于培养，且受外界环境影响较小，节省较多人力资源。所以从细胞水平来评价化妆品及其原料的保湿性是一种经济实惠的方法。

专利CN102888439A公开了一种用于体外评估保湿/抗干燥损伤功效的方法，该方法构建了一种细胞干燥模型，包括以培养基培养细胞、细胞同步化、细胞铺板、加入药物、干燥和噻唑蓝测定步骤，所述干燥步骤为：吸去培养基后，在干燥风速0.1m/s-1.0m/s、湿度为15％-50％和20-30℃温度下放置5min-20min。

一般可用烘箱干燥法、风吹干燥法来对细胞造成干燥损伤，制备干燥模型。但是烘箱较难精确保持温度，一般烘箱的最低温度是环境温度加10℃，在炎热的夏季，烘箱温度一般是40-45℃，在此温度下进行干燥，会对细胞造成一定程度的热损伤。而风吹干燥法一般是在超净台中利用超净台的风来对细胞造成干燥损伤，这种方法的缺点是需要垂直气流的超净台，且超净台风速不稳定及风速的均匀性不佳，对实验结果稳定性影响较大。

发明内容

本发明的目的是建立一种人皮肤细胞干燥模型，其可以用于评价化妆品及其原料保湿性能。

具体地，本发明涉及：

1.一种干燥细胞模型建立方法，所述方法包括以下步骤：

细胞培养步骤，于细胞培养板上在控温、控湿条件下对细胞进行培养；

细胞干燥步骤，吸干经细胞培养步骤后的细胞培养液，然后在风速小于0.1m/s、相对湿度在10.0％以下，温度在25℃±5℃的条件下暴露细胞；

再培养步骤，在控温、控湿条件下对细胞进行再培养，使经干燥处理的细胞活力降至45％-70％，其中，经干燥处理的细胞活力是指由WST-1方法测得，将在给定条件下进行孵育后的未经干燥处理组的吸光度值定义为细胞活力为100％，在给定条件下对经干燥处理组进行同样的孵育后，测定其吸光度值，得到经干燥处理组的吸光度值/未经干燥处理组的吸光度值的检测结果，并以百分比表示的所述检测结果。

2.根据项1所述的干燥细胞模型建立方法，其中，

用于构建所述干燥细胞模型的细胞是人皮肤细胞，

所述人皮肤细胞选自人皮肤成纤维细胞或者人皮肤角质形成细胞；