[发明专利]一种利用紫茎泽兰培养北方根结线虫的方法

说明书

一种利用紫茎泽兰培养北方根结线虫的方法，属生物技术领域。步骤为：采集或采购北方根结线虫或卵囊冷藏备用，准备紫茎泽兰的培养材料，准备种植基质，接种。本发明的优点：紫茎泽兰的生命力和适应能力强，易成活，容易种植，对大部份种类的线虫均不敏感，对北方根结线虫有较高的专一对应性，容易得到单一的北方根结线虫；紫茎泽兰繁育根结线虫成本较为低廉；且比其他作物繁育周期更长，可持续不断的获取北方根结线虫活体；可一次接种反复使用。

技术领域

本发明属生物技术领域，具体涉及培养北方根结线虫的方法。

背景技术

根结线虫(Meloidogyne spp.)是一种高度专化型的杂食性植物病原线虫，而北方根结线虫(Meloidogyne hapla)更是主要侵害农作物的线虫之一。北方根结线虫主要寄生作物于根部，导致肿瘤。在虫口密度大的地块，根部形成众多的肿瘤，严重时根腐烂脱落，导致叶黄化，生长停止，植株萎蔫而枯死，尤其是对长匐茎的假植床和苗床为害比较严重。北方根结线虫危害面极广，除少数几种作物外，几乎侵害所有的旱作农作物，特别对一年生茄科作物、一年生十字花科作物造成的危害最为严重。近年来北方根结线虫病也成为中药材三七的重要病害之一。人们在防治北方根结线虫病的研究过程中，需要大量的北方根结线虫。虽然可以用直接用三七繁殖北方根结线虫，但费用高，且三七对环境条件要求高，往往受季节、地理位置等影响。若用番茄繁殖，因番茄对大部分根结线虫均存在较为敏感的情况，繁育过程中容易出现多种线虫同时感染而难以分离出相对单一品种的线虫。也有采用花生根培养北方根结线虫的，但花生根只能使用一次。至今没有利用紫茎泽兰培养北方根结线虫的方法。

发明内容

本发明的目的在于基于现有技术存在的问题，提供一种利用紫茎泽兰培养北方根结线虫的方法。

本发明方法可以是包括以下步骤：

1.采集或采购北方根结线虫冷藏备用。北方根结线虫有商品可供采购，也可以按现有技术方法自行采集。

若自行采集北方根结线虫，最佳方法是：

挖取处于采收末期的茄科作物的植株完整根系，取根系上的根结，水洗后用蒸馏水于室温下浸泡10～18小时，收集带沉淀物的浸泡液，2～6℃下保存待用，再将浸泡过的根结重复上述过程2～4次，抛弃根结，将几次收集的带沉淀物浸泡液合并，过15～20目分离筛，将过筛后所得物静置3～5小时，轻轻移弃上部占静置物总体积75～85％的液体后，将下部剩余物经1500～2500r/min离心1～3分钟，弃去上清液，向剩余物中加入浓度为480～500g/L的蔗糖水，所加蔗糖水的体积为该剩余物体积的3～5倍，混匀后经1500～2500r/min离心1～3分钟，上清液过700～900目分离筛，收集分离筛上的虫体，经镜检检定为北方根结线虫后3～5℃冷藏备用，冷藏时间不大于72小时。本步骤所述茄科作物最好为番茄，蒸馏水最好为单蒸水，根结的浸泡最好为3次。

2.准备紫茎泽兰的培养材料

选取生长时间不大于2月，株高度不大于1.0米，根系长度在10cm以上的紫茎泽兰健康植株，用水洗净，放置在通风处待表面水干后，将植株的上部和主芽去除，去除的上部占植株总长度的25～35％，获得紫茎泽兰的培养材料，备用。

3.准备种植基质

取适宜紫茎泽兰种植的土壤，在80～120℃下干燥1.5～2.5小时，以杀灭土壤内可能含有的其它线虫及虫卵，将恢复至室温后的土壤均匀铺设在透气良好的容器底，土壤厚度为1.5cm-2.0cm，备用。取直径2-8mm的蛭石颗粒灭菌后备用。

4.接种