[发明专利]一种能够满足微量核酸生物样本提取纯化要求的试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.一种能够满足微量核酸生物样本提取纯化要求的试剂盒，其特征在于，由裂解液、结合液、磁珠、漂洗液和洗脱液组成，漂洗液又由漂洗液I和漂洗液II组成，其中：

裂解液的组成如下：

结合液的组成如下：

体积浓度为95-100％的醇溶液；

漂洗液I的组成如下：

漂洗液II的组成如下：

体积浓度为60-76％的乙醇溶液；

洗脱液的组成如下：

2.根据权利要求1所述的能够满足微量核酸生物样本提取纯化要求的试剂盒，其特征在于，在裂解液的配方中，所述表面活性剂为非离子去污剂。

3.根据权利要求2所述的能够满足微量核酸生物样本提取纯化要求的试剂盒，其特征在于，所述非离子去污剂为吐温20或十二烷基硫酸钠。

4.根据权利要求1所述的能够满足微量核酸生物样本提取纯化要求的试剂盒，其特征在于，在裂解液的配方中，所述螯合剂为乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸四钠或乙二胺四乙酸镁。

5.根据权利要求1所述的能够满足微量核酸生物样本提取纯化要求的试剂盒，其特征在于，在结合液的配方中，所述醇为乙醇或异丙醇。

6.根据权利要求1所述的能够满足微量核酸生物样本提取纯化要求的试剂盒，其特征在于，所述磁珠的浓度为50mg/mL。

7.权利要求1至6任意一项所述的能够满足微量核酸生物样本提取纯化要求的试剂盒的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：

Step1：将保存在细胞保存液中的生物样品离心，去除上清液，保留沉淀；

Step2：向沉淀中加入0.6mL的裂解液，混匀，然后放置在65℃空气培养箱中培养5-15min，或者，放置在65℃转速1600rpm金属浴中孵育5-15min，期间涡旋混匀三次；

Step3：离心，将全部上清液转移到新的离心管中，加20-40uL磁珠和0.2-0.4mL结合液，充分混匀，放置在磁力架上静置，然后吸掉液体；

Step4：加入0.9mL漂洗液I，充分混匀，放置在磁力架上静置，然后吸掉液体；

Step5：加入0.9mL漂洗液II，充分混匀，放置在磁力架上静置，然后吸掉液体；

Step6：加入0.9mL漂洗液II，充分混匀，放置在磁力架上静置，然后吸掉液体；

Step7：将离心管从磁力架上取下短暂离心，之后将离心管重新放回磁力架上，吸掉液体；

Step8：室温干燥，加100μL洗脱液，混匀，磁力架上静置，然后转移液体到新的离心管中即完成核酸的分离纯化。

8.根据权利要求7所述的使用方法，其特征在于，在Step2中，将样品放置在65℃空气培养箱中培养5-15min，或者，放置在65℃转速1600rpm金属浴中孵育5-15min。

9.根据权利要求7所述的使用方法，其特征在于，在Step3、Step4、Step5、Step6和Step8中，样品在磁力架上静置的时间为10s。

10.根据权利要求7所述的使用方法，其特征在于，在Step8中，室温干燥的时间为5min。