[发明专利]一种能够满足微量核酸生物样本提取纯化要求的试剂盒及其使用方法

说明书

本发明公开了一种能够满足微量核酸生物样本提取纯化要求的试剂盒及其使用方法，其中，该试剂盒由裂解液(含有表面活性剂、蛋白酶、螯合剂、Mg²⁺、K⁺、Na⁺等，pH值7.4‑8.0)、结合液、磁珠、漂洗液和洗脱液(pH值7.4‑8.0)组成，漂洗液又由漂洗液I(含有盐酸胍等)和漂洗液II(乙醇溶液)组成。本发明的有益之处在于：本发明提供的试剂盒，裂解细胞完全，提取核酸产量大、纯度高，完全能够满足微量核酸生物样本提取纯化要求；另外，没有用到有害试剂，使用安全。

技术领域

本发明涉及一种试剂盒及其使用方法，具体涉及一种能够满足微量核酸生物样本提取纯化要求的试剂盒及其使用方法，属于医学生物技术领域。

背景技术

传统的提取并纯化唾液核酸的方法是：苯酚/氯仿反复抽提，十二烷基酸钠将细胞膜裂解，在蛋白酶K、EDTA的存在下消化蛋白质、多肽或小肽分子，核蛋白变性降解，使核酸从核蛋白中游离出来。

可见，传统的提取纯化唾液核酸的方法不仅操作步骤繁琐，而且还会用到有害的试剂。

Chelex-100法是一种简单、快速、灵敏度高的核酸提取方法，其所用到的Chelex-100树脂是一种化学整合树脂，该Chelex-100树脂能结合许多可能影响下一步分析的其他外源物质，通过离心即可除去Chelex-100树脂颗粒以及与Chelex-100树脂颗粒结合的物质，使可能影响下一步分析的其他外源物质与核酸分离，通过结合金属离子，可防止核酸降解。

然而，采用Chelex-100法提取得到的核酸虽然产量够多，但是纯度不够高，不能满足微量核酸生物样本提取纯化的要求。

提取核酸的方法，除了Chelex-100法以外，还有试剂盒法。然而，市面上现有的试剂盒，虽然大部分基本能够满足微量核酸生物样本在产量方面的要求，但是能够满足微量核酸生物样本在纯度方面的要求的却很少。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种提取核酸产量大、纯度高，完全能够满足微量核酸生物样本提取纯化要求的试剂盒及其使用方法。

为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：

一种能够满足微量核酸生物样本提取纯化要求的试剂盒，其特征在于，由裂解液、结合液、磁珠、漂洗液和洗脱液组成，漂洗液又由漂洗液I和漂洗液II组成，其中：

裂解液的组成如下：

结合液的组成如下：

体积浓度为95-100％的醇溶液；

漂洗液I的组成如下：

漂洗液II的组成如下：

体积浓度为60-76％的乙醇溶液；

洗脱液的组成如下：

前述的能够满足微量核酸生物样本提取纯化要求的试剂盒，其特征在于，在裂解液的配方中，前述表面活性剂为非离子去污剂。

前述的能够满足微量核酸生物样本提取纯化要求的试剂盒，其特征在于，前述非离子去污剂为吐温20或十二烷基硫酸钠。

前述的能够满足微量核酸生物样本提取纯化要求的试剂盒，其特征在于，在裂解液的配方中，前述螯合剂为乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸四钠或乙二胺四乙酸镁。

前述的能够满足微量核酸生物样本提取纯化要求的试剂盒，其特征在于，在结合液的配方中，前述醇为乙醇或异丙醇。