[发明专利]一种从炮制桑枝中同时提取并分别纯化5种化学成分的方法及其应用

权利要求书

1.一种从炮制桑枝中同时提取并分别纯化5种化学成分的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)分别配制对照品溶液和供试品溶液；

(2)检测波长的选择：取桑皮苷A、绿原酸、白藜芦醇苷、白藜芦醇和桑辛素的对照品溶液在波长200-800nm范围内扫描，发现桑皮苷A、绿原酸在326nm处有最大吸收，白藜芦醇苷、白藜芦醇在328nm处有最大吸收，桑辛素在269nm处有最大吸收，最终选择峰数较多，分离较好，信号响应强度适当的波长作为最佳检测波长；

(3)采用高效液相色谱方法，高效液相色谱条件为：

色谱柱：Stamsil C18，色谱柱相关参数如下：250mm×4.6mm i.d，5μm，

流动相组成：流动相A为乙腈，流动相B为含0.1％磷酸的水溶液；

流速：0.8L/min，

检测波长330nm；

柱温：26℃；

进样量：20μL；

(4)建立标准曲线，求出桑枝生品中桑皮苷A、绿原酸、白藜芦醇苷、白藜芦醇和桑辛素的含量；

所述对照品溶液的制备方法如下：分别精密称取桑皮苷A对照品、绿原酸对照品、白藜芦醇苷对照品、白藜芦醇对照品和桑辛素对照品，加甲醇配成浓度分别为0.72、0.24、0.21、0.25和0.74mg/mL的混合对照品溶液，作为储备液；

所述供试品溶液的制备方法如下：精密称取桑枝生品粉末1.0021g，置具塞锥形瓶中，加25mL 80％甲醇，超声处理30min过滤，超声仪的功率为250kW，频率为40kHz，滤渣用相同方法继续提取1次，过滤，合并提取液，蒸干；残渣用甲醇溶解，并定容置于4mL容量瓶中，摇匀，过0.45μm微孔滤膜，滤液供HPLC分析；所述流动相按照梯度进行洗脱，按表2程序进行梯度洗脱，

表2 梯度洗脱程序表

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