[发明专利]兰科植物种子萌发、壮苗生根培养基及一步成苗组培方法

权利要求书

1.一种兰科植物种子萌发、壮苗生根培养基，其特征在于，所述培养基为液体培养基中加入限定量凝固剂的非固体培养基，凝固剂的浓度为0.25～6g/L。

2.根据权利要求1所述一种兰科植物种子萌发、壮苗生根培养基，其特征在于，所述凝固剂为琼脂或琼脂糖或卡拉胶，琼脂的浓度为0.5～5.5g/L，琼脂糖浓度为0.25～4.5g/L，卡拉胶浓度为1～6g/L。

3.根据权利要求2所述一种兰科植物种子萌发、壮苗生根培养基，其特征在于，所述种子萌发培养基具体配方组成为：MS+琼脂0.5～5.5g/L或琼脂糖0.25～4.5g/L或卡拉胶1～6g/L+6-BA 2mg/L+NAA 0.3mg/L+蔗糖30g/L，培养基pH为5.4～6.0。

4.根据权利要求2所述一种兰科植物种子萌发、壮苗生根培养基，其特征在于，所述壮苗生根培养基具体配方组成为：MS+琼脂0.5～5.5g/L或琼脂糖0.25～4.5g/L或卡拉胶1～6g/L+TDZ 0.6mg/L+2,4-D 0.3mg/L+KT 0.3mg/L+蔗糖30g/L，培养基pH为5.4～6.0。

5.一种兰科植物种子萌发培养方法，其特征在于，所述培养方法为悬浮培养方法，具体包括如下步骤：

(1)种子处理：在超净工作台上用纱布将种子包裹住，75％酒精消毒15～30s，0.1％氯化汞消毒3～5min，无菌水漂洗3次；

(2)配制种子萌发培养基，所述培养基配方组成为：MS+琼脂0.5～5.5g/L或琼脂糖0.25～4.5g/L或卡拉胶1～6g/L+6-BA 2mg/L+NAA 0.3mg/L+蔗糖30g/L，培养基pH为5.4～6.0；将种子萌发培养基倒入组培容器中，高温高压灭菌，冷却后；将消毒好的种子均匀的混合在种子萌发培养基里；

(3)种子萌发培养：将接种好种子的组培容器放置于培养架上进行培养。

6.根据权利要求5所述一种兰科植物一步成苗组培方法，其特征在于，种子萌发培养条件为：温度25～28℃，光照强度50～60μmol·m^-2·s^-1，光周期10h/d。

7.一种兰科植物一步成苗组培方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)种子萌发培养：种子萌发培养获得圆球茎或分化苗；

(2)配制壮苗生根培养基，所述培养基具体配方组成为：MS+琼脂0.5～5.5g/L或琼脂糖0.25～4.5g/L或卡拉胶1～6g/L+TDZ 0.6mg/L+2,4-D 0.3mg/L+KT0.3mg/L+蔗糖30g/L，培养基pH为5.4～6.0；将壮苗生根培养基倒入组培容器中，高温高压灭菌，冷却后，打开组织容器瓶盖，将高温高压灭菌过的支撑物平铺在液面上；

(3)壮苗生根培养：将圆球茎或分化苗转接到支撑物上，将接有圆球茎或分化苗的组培容器放置于培养架上培养直至成苗。

8.根据权利要求7所述一种兰科植物一步成苗组培方法，其特征在于，壮苗生根培养条件为：25～28℃，光照强度50～60μmol·m^-2·s^-1，光周期12h/d。

9.根据权利要求7或8所述一种兰科植物一步成苗组培方法，其特征在于，所述由种子萌发培养获得分化苗，培养时间为30～45d。