[发明专利]一种草鱼鱼鳔胶原蛋白自组装方法及胶原蛋白生物原材料

说明书

本发明公开了一种草鱼鱼鳔胶原蛋白自组装方法及胶原蛋白生物原材料，白自组装方法包括以下步骤：从草鱼中提取获得草鱼鱼鳔胶原蛋白；从草鱼中提取获得草鱼肌原纤维蛋白；将提取的草鱼肌原纤维蛋白酶解，得到草鱼肌原纤维蛋白酶解产物；配置草鱼鱼鳔胶原蛋白醋酸溶液，在25‑40℃、pH 6.0‑7.0的条件下，加入氯化钠溶液，与草鱼肌原纤维蛋白酶解产物，进行草鱼鱼鳔胶原蛋白自组装反应。本发明中草鱼鱼鳔胶原蛋白自组装，利用草鱼肌原纤维蛋白酶解产物促进了草鱼鱼鳔胶原蛋白自组装，使其空间结构更为致密，提高草鱼鱼鳔胶原蛋白的性能。

技术领域

本发明属于生物食品技术领域，具体涉及一种草鱼鱼鳔胶原蛋白自组装方法及胶原蛋白生物原材料。

背景技术

草鱼是我国四大家鱼之首，因其高蛋白、低脂肪、捕获量大等优点受到广泛欢迎。但在草鱼的使用和加工中，由于加工技术相对落后及饮食习惯等原因，鱼鳔、鱼皮、鱼鳞等并未得到充分的利用，经常作为下脚料而遭遗弃。从草鱼鱼鳔中提取胶原蛋白既减少了资源浪费又增加了经济效益。

胶原蛋白(collagen)是一类在生物体中广泛存在的纤维状结构蛋白质，根据其分子结构的差异，可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ等多种类型，其中Ⅰ型胶原蛋白是生物体中最主要的存在形式，其结构特征是由两条α1和一条α2肽链形成的三螺旋结构。由于胶原蛋白具有良好的生物相容性、加工适应性和低免疫排斥性，近年来其作为医学组织工程的主要生物材料在人造皮肤、人造血管、创伤修复等领域均得到了广泛的应用。

胶原蛋白在体外自组装形成高度有序的网状结构，有利于细胞的黏附、增殖、扩散和迁移，具有良好的生物相容性、优异的力学性能、可生物降解性和弱抗原性。近年来，设计和合成具有优异性能的胶原蛋白自组装生物功能材料已成为研究热点。然而目前关于草鱼鱼鳔胶原蛋白自组装行为的研究还未有报道。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种草鱼鱼鳔胶原蛋白自组装方法，提高胶原蛋白的性能。

本发明的技术方案为：一种草鱼鱼鳔胶原蛋白自组装方法，包括以下步骤：

(1)从草鱼中提取获得草鱼鱼鳔胶原蛋白；

(2)从草鱼中提取获得草鱼肌原纤维蛋白；

(3)将提取的草鱼肌原纤维蛋白酶解，得到草鱼肌原纤维蛋白酶解产物；

(4)配置草鱼鱼鳔胶原蛋白醋酸溶液，在25-40℃、pH 6.0-7.0的条件下，加入氯化钠溶液，与草鱼肌原纤维蛋白酶解产物，进行草鱼鱼鳔胶原蛋白自组装反应。

作为优选，所述草鱼鱼鳔胶原蛋白醋酸溶液的浓度为1.0-4.0mg/mL。

作为优选，所述肌原纤维蛋白酶解产物的浓度为0.5-2.0mg/mL。

作为优选，所述氯化钠溶液的浓度为50-100mmol/mL。

作为优选，所述步骤(1)中提取草鱼鱼鳔胶原蛋白的步骤包括：

将草鱼鱼鳔脱脂后充分水洗至中性，加入提取剂反应24-48h，离心，将上清液加入预冷氯化钠盐析，静置，再离心取沉淀，上清液重复盐析操作，合并沉淀用醋酸溶解，透析，真空冷冻干燥后保藏待用。具体过程为：草鱼鱼鳔脱脂后充分水洗至中性，加入0.5M醋酸(1:10，w/v)、0.1％(w/v)3000U/mg胃蛋白酶，反应24-48h，5000r/min下离心20min，上清液加入预冷氯化钠盐析，静置4h，再离心取沉淀，上清液重复盐析操作，合并沉淀用10倍体积0.5M醋酸溶解，透析，真空冷冻干燥后-20℃保藏待用。

作为优选，所述步骤(2)中提取获得草鱼肌原纤维蛋白的步骤包括：

将草鱼鱼肉剁碎后，加入预冷氯化钠溶液进行匀浆，并置于冰浴中搅拌，过滤，离心之后，取沉淀再加入预冷氯化钠溶液匀浆、离心，循环清洗，所得沉淀即为草鱼肌原纤维蛋白。