[发明专利]纳米金杂交反应体系特征波长与区分时间的获取方法及核酸检测方法

权利要求书

1.一种纳米金杂交反应体系特征波长与区分时间的获取方法，其特征在于，包括如下步骤：

配制纳米金杂交反应体系，包括阳性反应体系和阴性反应体系，所述阳性反应体系中纳米金保持分散状态，所述阴性反应体系中纳米金由于杂交而发生交联；

在预设反应温度下记录所述纳米金杂交反应体系对不同波长光的吸收强度值，获取关于该纳米金杂交反应体系的特征吸收波长；

在预设反应温度下依次间隔第二预设时间记录所述纳米金杂交反应体系在至少两个不同特征吸收波长下的吸收强度值之差随时间的变化，比较在当前两个特征吸收波长下的阳性吸收强度值之差与阴性吸收强度值之差，根据阳性吸收强度值之差与阴性吸收强度值之差之间的差值随时间的变化获取第二区分时间，在所选择的至少两个不同特征吸收波长中有两个不同波长满足：所述纳米金杂交反应体系对该两个不同波长的光的吸收强度随时间的变化趋势相反；

所述在预设反应温度下依次间隔第二预设时间记录所述纳米金杂交反应体系在至少两个不同特征吸收波长下的吸收强度值之差随时间的变化，是按照梯度关系设计多个所述第二预设时间分别进行实验，获取两个特征吸收波长的阳性吸收强度值之差与阴性吸收强度值之差之间的差值出现明显变化时的最短时间作为所述第二区分时间；

所述明显变化是指开始记录后随时间推移所述差值开始小于预设差值，或者开始记录后随时间推移所述差值开始大于预设差值。

2.如权利要求1所述的纳米金杂交反应体系特征波长与区分时间的获取方法，其特征在于，所述纳米金杂交反应体系中含有纳米金探针和纳米金杂交反应探针。

3.如权利要求2所述的纳米金杂交反应体系特征波长与区分时间的获取方法，其特征在于，所述纳米金杂交反应体系中还含有PCR扩增引物和/或连接探针。

4.如权利要求1~3中任一项所述的纳米金杂交反应体系特征波长与区分时间的获取方法，其特征在于，所述在预设反应温度下记录所述纳米金杂交反应体系对不同波长光的吸收强度值是在反应温度达到所述预设反应温度时就开始记录所述吸收强度值。

5.如权利要求1~3中任一项所述的纳米金杂交反应体系特征波长与区分时间的获取方法，其特征在于，所述不同波长光为全波长可见光。

6.一种非疾病诊断和治疗目的的核酸检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

预先按照如权利要求1~5中任一项所述的纳米金杂交反应体系特征波长与区分时间的获取方法获取所使用的纳米金杂交反应体系的至少两个特征吸收波长和第二区分时间；

在预设反应温度下间隔一个所述第二区分时间记录含有所述纳米金杂交反应体系的待测样本在两个特征吸收波长下的吸收强度值之差，比较此刻待测样本溶液的吸收强度值之差与阴性吸收强度值之差，根据待测样本溶液的吸收强度之差与阴性吸收强度值之差的差值检测样本是否为阳性样本。

7.如权利要求6所述的非疾病诊断和治疗目的的核酸检测方法，其特征在于，所述纳米金杂交反应体系中含有序列如SEQ ID NO.7和8所示的纳米金探针和序列如SEQ ID NO.6所示的纳米金杂交反应探针；

所述预设反应温度为55℃；

所述特征吸收波长包括448nm、512nm和610nm；

所述第二区分时间为3min。