[发明专利]一种牛的胚胎移植液及其使用方法在审
申请号: | 201910551211.7 | 申请日: | 2019-06-24 |
公开(公告)号: | CN110331129A | 公开(公告)日: | 2019-10-15 |
发明(设计)人: | 张涌;张景程;王勇胜 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | C12N5/073 | 分类号: | C12N5/073;A01N1/02 |
代理公司: | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人: | 李冉 |
地址: | 712100 陕*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 胚胎移植 羟乙基哌嗪乙磺酸 基础培养基 红景天苷 磷酸钠盐 碳酸氢钠 硒添加剂 亚牛磺酸 转铁蛋白 巯基乙醇 瓜氨酸 牛胚胎 胰岛素 油酰基 甘油 添加剂 移植 | ||
1.一种牛的胚胎移植液,包括SOF基础培养基,其特征在于,所述胚胎移植液还包括以下添加剂:4-羟乙基哌嗪乙磺酸、碳酸氢钠、胰岛素-转铁蛋白-硒添加剂、β-巯基乙醇、亚牛磺酸、1-油酰基-sn-甘油-3-磷酸钠盐、L-瓜氨酸和红景天苷。
2.根据权利要求1所述的一种牛的胚胎移植液,其特征在于,所述4-羟乙基哌嗪乙磺酸浓度为1-3mg/mL,碳酸氢钠浓度为0.1-0.2mg/mL,胰岛素-转铁蛋白-硒添加剂体积分数为0.1-2%,β-巯基乙醇浓度为10-200μM,亚牛磺酸浓度为1-10mM,1-油酰基-sn-甘油-3-磷酸钠盐浓度为0.1-1μg/mL,L-瓜氨酸浓度为:0.01-0.03mg/mL,红景天苷浓度为0.01-0.2mM。
3.根据权利要求1或2所述的一种牛的胚胎移植液,其特征在于,所述胚胎移植液还包括必需氨基酸、非必需氨基酸和无脂肪酸牛血清白蛋白。
4.根据权利要求3所述的一种牛的胚胎移植液,其特征在于,所述必需氨基酸体积分数为0.1-2%,非必需氨基酸体积分数为0.1-2%,无脂肪酸牛血清白蛋白浓度为1-10mg/mL。
5.根据权利要求4所述的一种牛的胚胎移植液,其特征在于,每100mL所述SOF基础培养基包括26.168mg CaCl2·2H2O、9.999mg C6H5Na3O7·2H2O、2.923mg谷氨酰胺、37.218mgMgSO4·7H2O、49.904mg肌醇、1.000mg酚红、53.378mg KCl、16.195mg KH2PO4、4.402mg丙酮酸钠、629.399mg NaCl和0.0757mg乳酸钠。
6.根据权利要求5所述的一种牛的胚胎移植液,其特征在于,所述胚胎移植液还包括12μg/mL庆大霉素和12μg/mL头孢霉素。
7.一种牛的胚胎移植液的使用方法,其特征在于,将牛体外受精囊胚或者克隆囊胚置于权利要求1-6中任一项所述的胚胎移植液中进行运输和移植。
8.根据权利要求7所述的一种牛的胚胎移植液的使用方法,其特征在于,将胚胎移植液在38.5℃条件下预热至少半小时,然后将牛体外受精后6-7天的体外受精胚或者化学激活后6-7天的克隆胚胎加入胚胎移植液中,并用注射器在体式镜下吸入无菌麦管中;将麦管放入提前预热至38.5℃的便携式温箱中,带到牛舍;将麦管取出后装于灭菌过的移植枪上,套上塑封膜,进行牛的胚胎移植。
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