[发明专利]甘蔗属割手密特异序列及其鉴定方法有效
申请号: | 201910533250.4 | 申请日: | 2019-06-19 |
公开(公告)号: | CN110205329B | 公开(公告)日: | 2021-04-06 |
发明(设计)人: | 王凯;刀乙航 | 申请(专利权)人: | 福建农林大学 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12Q1/6895;C12Q1/686 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 350002 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 甘蔗 属割手密 特异 序列 及其 鉴定 方法 | ||
1.甘蔗属割手密特异序列,其特征在于,所述序列根据割手密和热带种基因组数据比对分析得到割手密特异序列1C,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.如权利要求1所述的甘蔗属割手密特异序列,其特征在于,所述序列1C的引物序列为:
上游引物:5' GCGGATGGTTTCTCTTAGGTTC 3';
下游引物:5' TAATGGCGTTAGGGAGTGGTTG 3'。
3.如权利要求1所述甘蔗属割手密特异序列的鉴定方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)利用甘蔗属割手密和热带种基因组数据对比分析得到割手密特异序列1C;
(2)将割手密特异序列1C进行PCR扩增,得到PCR产物;
(3)将PCR产物通过琼脂糖凝胶电泳鉴定。
4.如权利要求3所述的甘蔗属割手密特异序列的鉴定方法,其特征在于,上述步骤(2)中,PCR扩增的条件为:95℃预变性3min;95℃变性30s,61℃退火30s,72℃延伸1min,35个循环,72℃终延伸10min。
5.如权利要求3所述的甘蔗属割手密特异序列的鉴定方法,其特征在于,上述步骤(2)中,所述PCR扩增反应体系为:上下游引物即F/R(Forward primer /Reverse primer)各为0.25μL,DNA模板2μL,Mix 5μL,最后加入ddH2O将总体积补足至10μL。
6.如权利要求3所述的甘蔗属割手密特异序列的鉴定方法,其特征在于,上述步骤(3)中,琼脂糖凝胶电泳鉴定条件为:上样后用125V电压进行电泳,15min后查看结果。
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