[发明专利]一种龙脷叶总黄酮的制备方法

权利要求书

1.一种龙脷叶总黄酮的制备方法，其特征在于，包括步骤：

(1)选取龙脷叶药材的干燥叶，用95％乙醇加热回流提取，获得提取液，所述提取次数为两次，每次提取2小时，将两次获得的所述提取液冷却至室温，过滤合并，获得龙脷叶的提取液；

(2)将所述龙脷叶的提取液减压回收，浓缩至无醇味，获得龙脷叶醇提浸膏；

(3)将所述龙脷叶醇提浸膏与去离子水搅拌均匀，混悬过滤，获得龙脷叶醇提上清液，将所述龙脷叶醇提上清液用石油醚萃取，保留萃取得到的水层，经减压浓缩，获得龙脷叶萃取水层；

(4)所述龙脷叶萃取水层经ODS减压柱层析，以甲醇-水系统梯度洗脱，30％甲醇洗脱去除杂质，收集50％甲醇洗脱液，回收溶剂，获得龙脷叶总黄酮；

(5)所述龙脷叶总黄酮经ODS减压柱层析，分别以35％甲醇，50％甲醇洗脱，得到35％甲醇洗脱物和50％甲醇洗脱物，将所述35％甲醇洗脱物用75％乙醇溶解，经凝胶SephadexLH-20柱、75％乙醇洗脱，获得山柰酚-3-O-β-D-龙胆二糖苷、槲皮素-3-O-β-D-龙胆二糖苷、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷，将所述50％甲醇洗脱物用高效液相色谱柱检测，流速为10ml/min，检测波长为254nm，45％甲醇洗脱，获得山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖(1-6)-β-D-(2-去氧)葡萄糖苷，再用50％甲醇洗脱，获得化合物山柰酚-3-O-β-D-(2-去氧)葡萄糖苷。

2.根据权利要求1所述的一种龙脷叶总黄酮的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述干燥叶与95％乙醇的质量比为1：10。

3.根据权利要求1所述的一种龙脷叶总黄酮的制备方法，其特征在于：步骤(3)中所述龙脷叶醇提浸膏与去离子水的质量比为1：1.5。

4.根据权利要求1所述的一种龙脷叶总黄酮的制备方法，其特征在于：步骤(3)中所述龙脷叶醇提上清液与石油醚萃的质量比为2：3。

5.根据权利要求1所述的一种龙脷叶总黄酮的制备方法，其特征在于：所述山柰酚-3-O-β-D-(2-去氧)葡萄糖苷的结构为：

6.根据权利要求1所述的一种龙脷叶总黄酮的制备方法，其特征在于：所述山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖(1-6)-β-D-(2-去氧)葡萄糖苷的结构为：