[发明专利]一种核酸质谱检测标准品、制备方法及其应用在审
| 申请号: | 201910530759.3 | 申请日: | 2019-06-19 |
| 公开(公告)号: | CN110714064A | 公开(公告)日: | 2020-01-21 |
| 发明(设计)人: | 相双红;郭惠民;张郁;李志凯;张盼;王巍;殳晓强 | 申请(专利权)人: | 浙江迪谱诊断技术有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/6872 | 分类号: | C12Q1/6872;C12Q1/6806;C12N15/11 |
| 代理公司: | 11427 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 陈娟 |
| 地址: | 311100 浙江省杭州市余杭*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 核酸 质谱检测 标准品 短核酸 单链 脱氧核糖核苷酸 单链核酸片段 调谐 磷酸 核苷酸合成 核苷酸组成 安装调试 单链核酸 基因分型 加水稀释 体积混合 序列合成 序列信息 合成仪 加水量 质谱仪 干粉 脱盐 稀释 修饰 引物 质控 质谱 检验 制备 沉淀 浓缩 保证 | ||
1.一种核酸质谱检测标准品,其特征在于,含有多条至少由一种类型核苷酸合成的寡核苷酸。
2.根据权利要求1所述的一种核酸质谱检测标准品,其特征在于,所述寡核苷酸为单磷酸脱氧核糖核苷酸dNMP或经过修饰的单磷酸脱氧核糖核苷酸ddNMP。
3.根据权利要求1所述的一种核酸质谱检测标准品,其特征在于,所述多条寡核苷酸中至少有一条含有单磷酸脱氧核糖核苷酸,或者含有单磷酸脱氧核糖核苷酸及双脱氧核糖核苷酸混合。
4.根据权利要求1所述的一种核酸质谱检测标准品,其特征在于,所述每条寡核苷酸分子量大于等于200Da。
5.根据权利要求1所述的一种核酸质谱检测标准品,其特征在于,所述每条寡核苷酸之间的分子量最小差异为9Da。
6.一种权利要求1-5所述的核酸质谱检测标准品的制备方法,其特征在于,包含如下步骤:
(1)选取若干个核苷酸组成序列得到多条寡核苷酸;
(2)将多条寡核苷酸的序列信息导入合成仪,进行序列合成,经过纯化后用C18柱浓缩、脱盐、沉淀,得到引物干粉;
(3)计算加水量,根据计算结果加水稀释,得到各寡核苷酸片段浓度;
(4)计算标准品混合物所需各寡核苷酸片段的体积,将稀释后的寡核苷酸按计算的体积混合得到核酸质谱检测标准品。
7.根据权利要求6所述的核酸质谱检测标准品的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中合成的寡核苷酸纯化方式为HPLC、PAGE、RPC或者OPC。
8.根据权利要求1所述的一种核酸质谱检测标准品,其特征在于,所述合成的寡核苷酸加入干扰盐离子,其中盐离子浓度可独立调节。
9.一种核酸质谱检测标准品的应用,其特征在于,所述核酸质谱检测标准品用于包含进行调谐、调谐检验和基因分型检验。
10.根据权利要求9所述核酸质谱检测标准品的应用,其特征在于,应用核酸质谱检测标准品模拟核酸反应产物,与核酸反应产物同步或独立进行质谱检测,根据分子量大小,进行调谐、调谐检验和基因分型检验。
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