[发明专利]一种检测猪呼吸道疫病病原的高通量微流控芯片及检测方法

权利要求书

1.一种检测猪呼吸道疫病病原的高通量微流控芯片，包括LAMP扩增试剂、DNA/cDNA模板、ddH₂O、LAMP阳性对照、LAMP阴性对照、检测芯片、芯片探针、微流控芯片分析仪，所述检测芯片置于恒温扩增微流控芯片分析仪内，其特征在于，所述芯片探针包括SEQ ID NO：1～42所示的核苷酸序列；用于检测猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪圆环病毒3型、副猪嗜血杆菌、猪肺炎支原体、猪巴氏杆菌和猪流感毒的特异性核酸片段；

各个探针DNA序列如下：

猪瘟病毒探针：SEQ ID NO：1-5

SEQ ID NO：1 CATGCCCAAGACACACCTTA

SEQ ID NO：2 CGTGGCATCGTATACCGG

SEQ ID NO：3 CCTCTGCAGCACCCTATCAGGGGTCGCTAGGGTGAAATCAC

SEQ ID NO：4 TGCTGTACATGGCACATGGAGTTCCTCCACTCCCATTGGTT

SEQ ID NO：5 CGTACTCCCATCACGTGGT；

猪繁殖与呼吸综合征病毒探针：SEQ ID NO：6-11

SEQ ID NO：6 TGCTTAGGCTGGAGGGTG

SEQ ID NO：7 ATGGCACTGCTAGGCAAAT

SEQ ID NO：8 GCCCTGAACACATTCAAGGGGGAGCATTGGACCGTCTCTGT

SEQ ID NO：9 AGCATAAGGGCGGTCTTGGTTTCAAGGCAGGCAGGATCA

SEQ ID NO：10 TTATGCTCACAACAGCCCTGAAC

SEQ ID NO：11 ACTGGCTGAGGTAATGCATTTG；

猪圆环病毒2型探针：SEQ ID NO：12-17

SEQ ID NO：12 GGGAGTCTGGTGACCGTT

SEQ ID NO：13 CCATCCCACCACTTGTTTCT

SEQ ID NO：14 ACGCTTCTGCATTTTCCCGCTCGAGCAGCACCCTGTAACG

SEQ ID NO：15 CACGTCATTGTGGGGCCACCTTCCAGTATGTGGTTTCCGG

SEQ ID NO：16 TTCAAAAGTTCAGCCAGCCC

SEQ ID NO：17 TGTGGTAAAAGCAAATGGGCT；

猪圆环病毒3型探针：SEQ ID NO：18-23

SEQ ID NO：18 TCCAGTTTTTTCCGGGACAT

SEQ ID NO：19 AACACTTGGCTCCAAGACG

SEQ ID NO：20 CTTTTTCTCCAGACCCACCCCAAAAGCAGTGCTCCCCATTG

SEQ ID NO：21 TTCCCGCCAGAATTGGTTTGGGGCGGAAAGTTCCACTCGTAA

SEQ ID NO：22 ACACATATGACCCCACCGT

SEQ ID NO：23 GGTGAAGTAACGGCTGTGTTT；

副猪嗜血杆菌探针：SEQ ID NO：24-27

SEQ ID NO：24 CGAAAGCAACGGATATCGT

SEQ ID NO：25 CACCACCGAATTTCTCAGAA

SEQ ID NO：26 CTGCTTTCGCGTGTTGGATTGCTCTTGTAGTAGCAGCTGACG

SEQ ID NO：27 GCCGATCGTGGTTGCGGTAAACTCTTGTTCTACACGCTCT；

猪肺炎支原体探针：SEQ ID NO：28-33

SEQ ID NO：28 AGGCAGCAACTTCAACAA

SEQ ID NO：29 ATCAGATCCAGTAATTAGTCGA

SEQ ID NO：30 GGCGCTGGACTTAAATTAGCTCAAAAAACCAGGATGCACAA

SEQ ID NO：31 ATTGCCCCTGAAAATGGAAGTTCATAGGCAACAATCGGAAT

SEQ ID NO：32 GCTTGCTGAGTGAGTCAGTTAT

SEQ ID NO：33 AGTTGGAACTGCTGTTAATACA；

猪巴氏杆菌探针：SEQ ID NO：34-37

SEQ ID NO：34 TGTCGGTAGTCTTTTATTTGG

SEQ ID NO：35 AACGTAACTCAACATGGAAAT

SEQ ID NO：36 TCAAGGAAGCAGATTGGCTCAAGGCAAAGAAAAGCACAGT

SEQ ID NO：37 GCGCAACTGATTGGACGTTACAAGGAAATATAAACCGGCA；

猪流感病毒探针：SEQ ID NO：38-42

SEQ ID NO：38 CATGCCCAAGACACACCTTA

SEQ ID NO：39 CGTGGCATCGTATACCGG

SEQ ID NO：40 CCTCTGCAGCACCCTATCAGGGGTCGCTAGGGTGAAATCAC

SEQ ID NO：41 TGCTGTACATGGCACATGGAGTTCCTCCACTCCCATTGGTT

SEQ ID NO：42 CGTACTCCCATCACGTGGT。