[发明专利]一种同时检测食品中20种生物碱的色谱-质谱联用方法

说明书

本发明提供了一种同时检测食品中20种生物碱的色谱‑质谱联用方法，属于食品检测技术领域。本发明使用乙腈和Na₂EDTA‑Mcllvaine缓冲液提取样品中的生物碱目标物，得到待测液；然后将待测液依次进行色谱分析和质谱分析。本发明的联用方法对20种生物碱的定量下限为5.0μg/kg；对奶粉、蜂蜜、麦片和辅食四类样品进行3个浓度水平的添加回收实验，平均回收率为81％～109％，相对标准偏差为在1.6％～8.3％。本发明提供的联用方法操作简单，检出限低，灵敏度高，稳定性好，可以快速、准确地进行定性和定量分析，从而为食品中有毒生物碱的安全评价提供依据。

技术领域

本发明涉及食品检测技术领域，尤其涉及一种同时检测食品中20种生物碱的色谱-质谱联用方法。

背景技术

有毒化学品污染食品供应是一个重大的公共卫生问题。粮食恐怖主义，或有意污染粮食来源，以及无意污染，都有可能导致广泛的疾病或死亡和经济困难。生物碱是一类具有含氮有机化合物，是一种天然毒素，存在于多种植物物种。生物碱具有高效的药理作用和生理活性，它们是植物对食草动物的次生代谢产物，被认为是传播最广泛的天然毒素之一，可通过食物链影响野生动物、家畜和人类。阿富汗、印度、南非和前苏联都有文献记载，它们与以有毒植物为食或以受污染的饲料/饲料喂养的动物有关。人类中毒主要是由于食用了受污染的传统草药、受污染的牛奶或蜂蜜(从蜜蜂体内转移)。也有文献报道了红酒中添加乌头碱中毒而导致的杀人案。为了预防或尽量减少这类有害影响，公共卫生实验室必须能够及时有效地对紧急情况作出反应。

近年来，生物碱中毒事件时有发生，生物碱的残留分析技术引起了研究人员的广泛关注。生物碱的测定方法主要有化学分析法、分光光度法、薄层色谱法、高效液相色谱法、高效液相色谱串联质谱法等。化学分析法、分光光度法操作简便、成本低廉、适用于总生物碱含量测定方法。依托色谱的分离优势，薄层色谱法、高效液相色谱法可用于单体生物碱含量的测定。

高效液相色谱串联质谱法结合了液相色谱高效的在线分离能力和质谱的高选择性、高灵敏度，具有同时检测多种不同性质目标物的能力，在药物多残留分析中显示出越来越广阔的应用前景。火锅底料中中吗啡、可待因、罂粟碱等阿片类生物碱可以采用QuEChERS方法快速提取后，再结合液相色谱-串联质谱法进行准确测定。蜂蜜中倒千里光碱、克氏千里光宁等吡咯里西啶类生物碱可以采用强阳离子固相萃取柱进行富集和净化，然后高效液相色谱串联质谱进行定性和定量分析。现有的液相色谱-串联质谱法大多只适用于检测化学性质相近的一类生物碱，对化学性质差别巨大的多类生物碱同时检测尚未建立有效的检测方法。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种同时检测食品中20种生物碱的色谱-质谱联用方法，本发明的方法能够快速、准确地测定结构差异显著、化学性质悬殊的20种生物碱；且方法操作简易，检出限低，灵敏度高，稳定性好。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种同时检测食品中20种生物碱的色谱-质谱联用方法，包括以下步骤：

待测液的配制：将待测样品、乙腈和Na₂EDTA-Mcllvaine缓冲液混合后，经过滤，得到待测液；

将所述待测液依次进行色谱分析和质谱分析；

所述色谱分析条件：

色谱柱：C18；

柱温：30～50℃；

进样量：1.0～5.0μL；

流速0.2～0.6mL/min；

流动相洗脱程序：

0～1.0min：10％～20％流动相B，80～90％流动相A；