[发明专利]从羊肚菌单孢杂交育种所得菌株中获取杂交菌株的方法有效
申请号: | 201910501344.3 | 申请日: | 2019-06-11 |
公开(公告)号: | CN110122174B | 公开(公告)日: | 2021-05-28 |
发明(设计)人: | 陈青君;果禹鑫;张国庆;王祎璠;曹娜;丁红伟 | 申请(专利权)人: | 北京农学院 |
主分类号: | A01G18/00 | 分类号: | A01G18/00;A01H1/02 |
代理公司: | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人: | 王焕 |
地址: | 100000*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 羊肚菌单孢 杂交育种 所得 菌株 获取 杂交 方法 | ||
1.一种从羊肚菌单孢杂交育种所得菌株中获取杂交菌株的方法,其特征在于,包括:
a)获取供杂交的单孢子群,将所述单孢子群中的单孢子进行分离培养,获得各个单孢子的单群落;
b)鉴定所述单群落中单孢子的基因型为MAT1-1-1还是MAT1-2-1基因型;将鉴定出的仅含有MAT1-1-1基因以及仅含有MAT1-2-1基因的单群落分别培养得到固体原种;
c)选取含有MAT1-1-1和MAT1-2-1的所述固体原种两两配对配制多个杂交组,所述杂交组中,MAT1-1-1和MAT1-2-1基因型的单孢子比例为1:1;
d)将各个杂交组中的2个单群落固体原种混合后分别田间杂交种植得到杂交组合的子实体;
e)鉴定所述杂交组合的子实体的基因型,筛选同时含有MAT1-1-1和MAT1-2-1基因且具有农艺优良性状的子实体。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤a)中,所述单孢子群中的单孢子的获取方法包括:
将新鲜的羊肚菌子囊果放置在无菌支持物上,在阴凉通风的环境下使子囊孢子自然弹射。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述支持物为锡纸。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤b)和步骤e)中,鉴定基因型的方法独立的选自PCR、测序、HRM、核酸杂交中的一种或多种。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤a)中,所述分离培养所用的培养基为孟加拉红培养基。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤a)还包括,将所述单群落在PDA中培养进行扩繁。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤c)中,以重量份计,制备所述固体原种所用的培养基包括木屑35~41份,棉籽壳17~23份,小麦17~23份,土17~23份,石灰0.7~1.3份以及石膏0.7~1.3份。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述棉籽壳经过发酵。
9.根据权利要求7或权利要求8所述的方法,其特征在于,在步骤c)中,制备所述固体原种时的培养条件为17℃~23℃培养7~13天。
10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤d)中,田间杂交50~60天后获得杂交组合的子实体。
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