[发明专利]一种快速检测含褐藻多酚的肌原纤维蛋白在UVA辐照过程中品质变化的方法有效
| 申请号: | 201910500835.6 | 申请日: | 2019-06-11 |
| 公开(公告)号: | CN110220932B | 公开(公告)日: | 2022-08-26 |
| 发明(设计)人: | 启航;蒋迪;时逸馨;乔昕昱;谷月;申平;贺宝玉;董秀萍;姜鹏飞 | 申请(专利权)人: | 大连工业大学 |
| 主分类号: | G01N24/10 | 分类号: | G01N24/10;G01N1/28 |
| 代理公司: | 大连格智知识产权代理有限公司 21238 | 代理人: | 刘琦 |
| 地址: | 116034 辽宁省大*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 快速 检测 褐藻 纤维蛋白 uva 辐照 过程 品质 变化 方法 | ||
1.一种快速检测含多酚的肌原纤维蛋白在UVA辐照过程中品质变化的方法,其特征在于,包括步骤:
S1、取含有褐藻多酚的肌原纤维蛋白溶液试样,加入自由基捕获剂POBN,得混合样品;所述POBN的终浓度为20~50mM;所述POBN为a-(4-吡啶基-1-氧)-N-叔丁基硝基酮;
S2、将步骤S1所述混合样品进行UVA照射;
S3、将UVA照射后的样品用毛细管吸取,进行电子自旋共振检测:电子自旋共振检测的扫描条件为:中心磁场:3450~3490G;扫描宽度:55~105G;频率:9.00~10.00GHz;衰减器:10.00~30.00dB;功率:8.00~10.00mW;接收增益:1.00×105~1.00×106;调制频率:100kHz;调制幅度:1.00G;相位调变:0.00deg;偏移量:0.00%;时间常数:4000.00~6000.00msec;转换时间:300.00~400.00msec;
步骤S1所述含有褐藻多酚的肌原纤维蛋白溶液试样的制备方法为:取肌原纤维蛋白溶于pH6、25mM磷酸盐缓冲液中,配置成浓度为35~70mg/mL的肌原纤维蛋白溶液,向所述肌原纤维蛋白溶液中加入褐藻多酚,得含有多酚的肌原纤维蛋白溶液试样;所述褐藻多酚的添加量为:以所述肌原纤维蛋白溶液中肌原纤维蛋白的含量为基准,每克肌原纤维蛋白添加20~700μmol褐藻多酚;所述25mM磷酸盐缓冲液中含有0.6MNaCl。
2.根据权利要求1所述快速检测含多酚的肌原纤维蛋白在UVA辐照过程中品质变化的方法,其特征在于,步骤S2所述UVA照射的条件为:4℃、照射强度5~10W/m2、照射时间1~4h、接受照射的混合样品高度为1mm~10mm。
3.根据权利要求1所述快速检测含多酚的肌原纤维蛋白在UVA辐照过程中品质变化的方法,其特征在于,所述肌原纤维蛋白为鱼肌原纤维蛋白。
4.根据权利要求3所述快速检测含多酚的肌原纤维蛋白在UVA辐照过程中品质变化的方法,其特征在于,所述鱼肌原纤维蛋白为马鲛鱼肌原纤维蛋白、罗非鱼肌原纤维蛋白或草鱼肌原纤维蛋白。
5.根据权利要求1所述快速检测含多酚的肌原纤维蛋白在UVA辐照过程中品质变化的方法,其特征在于,所述褐藻多酚为海带多酚或裙带菜孢子叶多酚。
6.根据权利要求1所述快速检测含多酚的肌原纤维蛋白在UVA辐照过程中品质变化的方法,其特征在于,包括步骤:
S1、从马鲛鱼肉中提取肌原纤维蛋白,溶于pH6、25mM磷酸盐缓冲液,制备成浓度为50mg/mL的肌原纤维蛋白溶液;加入裙带菜孢子叶多酚,得含有裙带菜孢子叶多酚的肌原纤维蛋白溶液试样;以所述肌原纤维蛋白溶液中的肌原纤维蛋白总量计,每克肌原纤维蛋白添加625μmol裙带菜孢子叶多酚;将自由基捕获剂POBN加入所述含有裙带菜孢子叶多酚的肌原纤维蛋白溶液试样中,使自由基捕获剂POBN的浓度为40mM,得混合样品;所述25mM磷酸盐缓冲液中含有0.6MNaCl;
S2、将步骤S1所得混合样品4℃条件下进行UVA照射;其中,所述UVA照射处理时间为1h,照射强度10W/m2,接受照射的混合样品的液面高度为5mm;
S3、用毛细管吸取步骤S2接受UVA照射后的混合样品溶液,进行电子自旋共振检测:电子自旋共振检测的扫描条件为:中心磁场:3470G;扫描宽度:80G;频率:9.75GHz;衰减器:20.00dB;功率:9.66mW;接收增益:1.00×105;调制频率:100kHz;调制幅度:1.00G;相位调变:0.00deg;偏移量:0.00%;时间常数:5242.88msec;转换时间:360.00msec。
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