[发明专利]肝细胞癌相关基因的siRNA分子及其应用

说明书

提供了一种肝细胞癌相关基因的siRNA分子及其应用。该siRNA分子能够抑制包括AEG‑1、Cat S、IL‑6、IL‑6R基因中的至少一种基因的表达；其中，抑制AEG‑1基因的siRNA分子为SEQ ID NO:1～6中任意一对；抑制Cat S基因的siRNA分子为SEQ ID NO:7～8、SEQ ID NO:9～12中任意一对；抑制IL‑6基因的siRNA分子为SEQ ID NO:13～18中任意一对；抑制IL‑6R基因的siRNA分子为SEQ ID NO:19～24中任意一对。所提供的siRNA分子可以抑制肝细胞癌中相关基因的表达，从而用于治疗肝细胞癌。

技术领域

本发明涉及siRNA分子及其应用，具体涉及一种肝细胞癌相关基因的siRNA分子及其应用。

背景技术

原发性肝癌是目前世界上常见的恶性肿瘤之一，严重威胁人类健康，死亡率极高。根据肿瘤组织学分型可以分为肝细胞肝癌、胆管细胞型肝癌及混合性肝癌，其中肝细胞癌症占90％，是最常见的类型。

肝细胞癌的发病机制非常复杂，涉及多种基因的突变、细胞信号通路和新生血管的异常增生。近年来，随着对肝细胞癌分子机制的深入研究，肝细胞癌的某些特异性基因表达产物、生长因子及其受体和信号通路成为肝细胞癌治疗的潜在靶点。在肝细胞癌药物研发方面，迄今为止，索拉非尼仍然是唯一获得批准治疗晚期肝癌的分子靶向药物。因此寻求能够治疗肝癌的药物或基因疗法迫在眉睫。

RNA干扰(RNA interference,RNAi)现象是在1998年被发现，成为一种特异性抑制靶基因表达的有效工具。因此针对肿瘤特定表达基因，设计短干扰RNA(short interferingRNA，siRNA)，可以高效的抑制肿瘤相关基因的表达，降低蛋白水平，干扰肿瘤细胞的信号传导，从而对肿瘤进行基因治疗。而且siRNA仅仅作用于靶基因的mRNA，而不影响其他基因的转录与表达，因此siRNA介导的肿瘤基因治疗具有安全高效的特点。

针对肝癌发病相关基因设计siRNA用于肝癌的治疗，具有重要的意义。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种肝细胞癌相关基因siRNA分子及其在治疗肝细胞癌中的应用。

本发明是基于发明人的如下研究获得的：

本发明的发明人主要对肝细胞癌发病相关基因进行研究和筛选，确定了与肝细胞癌相关的四种基因，针对这几种基因进行siRNA分子的筛选以及对siRNA鸡尾酒组合的作用效果进行探索，从而为肝癌治疗药物的研发提供新方法。AEG-1、Cat S、IL-6、IL-6R基因可以分别通过不同的信号通路影响肿瘤的形成，增殖或者转移。通过对这些基因进行研究，可以设计针对这些基因中的任意一个基因的siRNA分子，或者是设计针对任意两个，任意三个或者全部基因的siRNA分子，实现单靶点或者多靶点的同时抑制，从而可以通过不同的信号通路途径影响到肿瘤细胞的生长，用于肿瘤的治疗。

其中，星形细胞上调基因-1(Astrocyte elevated gene-1，AEG-1)是近年新发现的癌基因，存在于多种肿瘤组织中，可以促进肿瘤的形成、增殖、侵袭和转移等过程。研究显示肝细胞癌中AEG1的表达明显高于癌旁组织和正常肝组织，AEG1可以激活NF-κB、P13K/Akt、Wnt/β-catenin、MAPK等多个信号转导途径。另一方面，抑制AEG-1的表达，在体外明显降低人原发性肝癌细胞对5-FU的敏感性，AEG-1siRNA与5-FU联合应用，与单独使用5-FU相比，明显一直裸鼠中原发性肝细胞癌的生长。由此看见，以AEG1为靶点为肝细胞癌治疗提供新的视野。