[发明专利]一种抗热虫黄藻的培育方法在审
| 申请号： | 201910481478.3 | 申请日： | 2019-06-04 |
| 公开（公告）号： | CN110373329A | 公开（公告）日： | 2019-10-25 |
| 发明（设计）人： | 傅鹏程 | 申请（专利权）人： | 浙江山诺生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/12 | 分类号： | C12N1/12;C12R1/89 |
| 代理公司： | 北京七夏专利代理事务所(普通合伙) 11632 | 代理人： | 王彦丽 |
| 地址： | 312000 浙江省绍兴市舜江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 虫黄藻 接种 定向进化 集胞藻 突变株 光合生物反应器 生化反应器 单独培养 耐热性能 藻类培养 逐渐增加 热休克 生长 培育 健康 重复 申请 改造 | ||
【权利要求书】：
1.一种抗热虫黄藻的培育方法，其特征在于，具体包括以下步骤，
(1)接种：从珊瑚的共生膜中将健康的虫黄藻剥离下来，接种在光合生物反应器组内；
(2)培养：将步骤(1)中得到的健康虫黄藻接种到光合生化反应器组中进行单独培养；
(3)定向进化：培养到待虫黄藻进入对数生长期，放入热水浴箱内45℃加温热休克2小时，等待虫黄藻开始白化；然后放回25℃光合生物反应器内，待产生了完全的白化现象后，离心分离白化虫黄藻细胞，倒掉上清液，使用新鲜f/2人工海水培养液培养备用；
(4)重复上诉步骤，同时逐渐增加温度和热休克时间，最终使集胞藻突变株能在>45℃温度下正常生长。
2.如权利要求1所述的一种抗热虫黄藻的培育方法，其特征在于，光合生物反应器组由一个摇床和内置6个150ML摇瓶组成，工作液位为50ML，虫黄藻由f/2人工海水培养液培养，摇床内置光源，光合生物反应器表面光强度为200 Einstein/m-2/s；摇床初始温度调控在低于25℃，速度为80RPM。
3.如权利要求1所述的一种抗热虫黄藻的培育方法，其特征在于，步骤(4)过程中反复进行虫黄藻细胞热休克-白化-复苏的定向进化过程，逐渐增加温度从35℃升到47℃)和热休克时间从30分钟升到4小时，步骤(4)时长1年。
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