[发明专利]一株产细菌素的副干酪乳杆菌及其应用

说明书

本发明提供了一种产细菌素的副干酪乳杆菌及其应用。本发明涉及的副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)S20菌种保藏编号：CGMCC NO.17120，该菌株分离于西藏传统发酵食品“奶疙瘩”。采用硫酸铵分级沉淀从该菌株的MRS发酵上清液中提取获得细菌素粗提物。实验证明，该菌株产生的细菌素粗提物对金黄色葡萄球菌S.aureus和大肠杆菌E.coli有很强的抑制作用，通过二倍稀释法测得最低抑菌浓度分别为312、625μg/mL。该菌株所产的细菌素能够被中性蛋白酶和胰蛋白酶等蛋白酶所水解，不会在体内蓄积。本发明所筛选到的副干酪乳杆菌及其细菌素在发酵食品中有着广泛的应用前景。

技术领域

本发明涉及食品微生物技术领域，特别是涉及一株产细菌素的副干酪乳杆菌及其应用。

背景技术

细菌素(Bacteriocins)是由某些细菌的核糖体合成分泌到细胞外对近缘微生物具有抑制或杀灭作用的一类小分子肽或蛋白质。细菌素来源很广，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都可以产生，其中乳酸菌产生的细菌素称为乳酸菌素。乳酸菌是食品中公认的安全级微生物，其所产细菌素具有安全、无毒、容易被蛋白酶降解、不会在体内蓄积等优点而受到广泛关注。

自1969年英国食品防腐剂委员会和世界卫生组织联合食品添加剂专家委员会确认乳酸链球菌素(Nisin)为食品防腐剂以来，作为首个应用于食品中的乳酸菌素，Nisin以其产生基因稳定、抑菌效果好、食用安全而陆续被许多国家所接受。迄今已经发现有百余种乳酸菌素，但真正用于商业化的却很少，其中一个主要原因就是乳酸菌细菌素产量低以及分离纯化复杂，成本太高，难以实现工业化生产。

随着人们生活水平的提高，对食品、化妆品添加剂需求趋向于天然、健康、安全、营养和多功能性，乳酸菌素作为天然防腐剂的开发具有广阔的市场前景。然而，乳酸菌细菌素产量低是限制其大规模生产的瓶颈之一，目前提高乳酸菌素产量的途径有：高产菌株筛选、发酵条件调控、基因工程改造菌株、诱导调控和胁迫刺激应答等。当前，发酵条件优化仍然是提高乳酸菌细菌素最常用的方法，但存在费时、操作繁琐、工作量大、产量增加幅度较小、不确定因素多等缺点；构建基因工程菌株，表达产物存在活性低和安全性的问题；诱导调控和胁迫刺激应答是在转录水平上的调节，目前还处于起始阶段，对其诱导机理和调控方法还有待于进一步的研究(章检明,任璐雅,易华西,等.乳酸菌细菌素的高效表达方法研究[J].中国酿造,2014,33(7):29-33.)。所以，筛选乳酸菌素高产菌株仍是提高乳酸菌素的有效途径之一。

我国地域辽阔，乳酸菌资源丰富，传统发酵食品(酸奶、泡菜、乳扇等)的制作和食用已有几千年的历史，经过几千年的自然驯化，这些传统发酵食品中一些具有优良发酵特性的乳酸菌保留了下来。同时不同地域的自然环境和气候，以及我国不同地区制备传统发酵食品所采用的原料、工艺等方面的差异使得我国乳酸菌资源丰富的生物多样性和基因多样性是其他任何国家所没有的。因此，挖掘我国传统发酵食品中的乳酸菌资源，从中筛选高效、广谱的乳酸菌素产生菌，是获取新型乳酸菌素行之有效的方法。

发明内容

本发明目的是提供一种产细菌素的副干酪乳杆菌及其应用。

本发明从中国传统发酵食品中筛选并提供了一株产细菌素的副干酪乳杆菌，为新型细菌素的开发提供新菌种资源，为进一步研究其所产细菌素的性质、结构，开发新型、高效、广谱的细菌素打下基础。

本发明的技术方案如下：

本发明提供了一株产细菌素的副干酪乳杆菌，分类命名为副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)S20，其保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院中科院微生物研究所，其菌种保藏编号为：CGMCCNO.17120，保藏时间为2019年1月7日。